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文檔簡介
1、目的:探討葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)在牛黃膽酸鈉誘導的大鼠重癥急性胰腺炎時對中性粒細胞凋亡的作用。
方法:將54只雄性SD大鼠隨機分為兩組,分別建立假手術組(SO)及重癥急性胰腺炎組(SAP)模型,SO組24只、SAP組30只,5％的牛黃膽酸鈉逆行胰膽管注射制備大鼠重癥急性胰腺炎模型,對照組只開腹翻動胰腺即縫合,造模后分別于3h,6h,12h觀察大鼠的一般情況及死亡率,并處死大鼠,抽取靜脈血測定各個時間點血清淀粉酶的濃度
2、,分離中性粒細胞并用流式細胞儀檢測中性粒細胞的凋亡率,提取中性粒細胞蛋白做western-blot測定GRP78,Mcl-1蛋白的表達,用HE染色切片觀察胰腺的病理變化并對胰腺組織進行病理評分。
結(jié)果:重癥急性胰腺炎組的血清淀粉酶的濃度明顯高于對照組(P<0.01), SAP組在3h,6h,12h的淀粉酶濃度逐漸升高(P<0.01),至術后12h升至(6246.00±602.931);SAP組中性粒細胞凋亡率較SO組明顯降低,
3、隨時間延長而下降(P<0.01),至術后12h降至(1.300±0.5812);western-blot顯示SAP組中性粒細胞中GRP78,Mcl-1的表達較SO組明顯升高,隨著時間延長更明顯;SAP大鼠 PMN的凋亡率與 GRP78,Mcl-1蛋白水平呈負相關(r=-0.836,P<0.01)、(r=-0.895,P<0.01);病理HE染色SAP組有大量炎細胞及紅細胞浸潤。
結(jié)論:本研究表明,大鼠重癥胰腺炎時,外周血中性粒
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