丹參對(duì)氯沙坦藥代動(dòng)力學(xué)影響及其在中藥與西藥相互作用中的意義.pdf

1、中藥在我國(guó)及其他亞洲國(guó)家歷史悠久，已經(jīng)被證明對(duì)慢性病具有良好的治療優(yōu)勢(shì)，具有不良反應(yīng)少、毒性低等特點(diǎn)，在歐美國(guó)家逐步受到重視。以往大多數(shù)人認(rèn)為中藥來(lái)源于天然植物，安全無(wú)毒，也不會(huì)像化學(xué)藥一樣易發(fā)生藥物間的相互作用。事實(shí)上，中藥含有多種生物活性成分，其化學(xué)組成與化學(xué)合成藥物類(lèi)似，可通過(guò)協(xié)同或者拮抗作用共同發(fā)揮生理調(diào)節(jié)作用，也存在與多種類(lèi)型的藥物發(fā)生相互作用的可能。以往人們多重視化學(xué)藥物之間的相互作用，最近有關(guān)因中藥和化學(xué)藥相互作用而降低療

2、效和導(dǎo)致毒副反應(yīng)的報(bào)道日益增多，已引起了醫(yī)藥界的廣泛關(guān)注。
　　 氯沙坦是第一個(gè)用于臨床的非肽類(lèi)血管緊張素Ⅱ受體阻斷藥，能競(jìng)爭(zhēng)性拮抗血管緊張素Ⅱ受體中的AT1亞型引起的血管收縮，達(dá)到降低外周阻力治療高血壓的目的。在體內(nèi)，氯沙坦主要是通過(guò)CYP450酶中的CYP3A4及CYP2C9介導(dǎo)轉(zhuǎn)化成其活性代謝物EXP3174，二者都能與AT1受體選擇性結(jié)合，發(fā)揮抗血管緊張素Ⅱ的藥理作用，從而產(chǎn)生降壓作用。丹參其主要成分為丹參酮ⅡA和丹酚酸

3、B，由于丹參具有活血化瘀、降低血液粘滯度、改善血管彈性等作用，臨床上常用來(lái)配合氯沙坦治療原發(fā)性高血壓，以達(dá)到活血通脈及降壓目的。但是目前對(duì)丹參和氯沙坦的研究主要集中在藥效學(xué)領(lǐng)域，而對(duì)兩者相互作用的研究較少，因此研究丹參與氯沙坦的相互作用具有一定的臨床意義。本研究擬通過(guò)測(cè)定大鼠體內(nèi)單用氯沙坦和聯(lián)合使用氯沙坦與丹參及氯沙坦與丹參酮ⅡA，氯沙坦與丹參多酚酸鹽后氯沙坦及活性代謝物EXP3174的藥代動(dòng)力學(xué)改變情況，明確丹參及其主要成分對(duì)氯沙坦和

4、活性代謝物的影響;同時(shí)在體外采用RT-PCR和western-blot法測(cè)定丹參主要成分（丹酚酸B和丹參酮ⅡA）對(duì)CYP3A4和CYP2C9酶mRNA和蛋白水平表達(dá)的影響，在分子水平從CYP450酶活性的角度闡明丹參與氯沙坦之間相互作用的關(guān)系。
　　 本文建立了氯沙坦及代謝物EXP3174在大鼠血漿中的定量分析方法，方法學(xué)考察均符合要求，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品峰，含量測(cè)定方法簡(jiǎn)便可靠，適合于生物樣品成分的含量測(cè)定，并成功用于

5、氯沙坦與丹參片合并用藥后藥代動(dòng)力學(xué)的相互作用研究。實(shí)驗(yàn)分為一次給藥組和長(zhǎng)期給藥組，其中長(zhǎng)期給藥組給予丹參片，丹參酮ⅡA及丹參多酚酸鹽14天，再給予氯沙坦。SD大鼠隨機(jī)分為4組:A組單獨(dú)灌胃給藥氯沙坦片混懸液;B組灌胃給藥氯沙坦片和丹參片混懸液;C組灌胃給藥氯沙坦片和丹參酮ⅡA混懸液;D組灌胃給藥氯沙坦片和丹參多酚酸鹽混懸液，于氯沙坦給藥后在不同時(shí)間點(diǎn)從大鼠眼眥靜脈叢取血，高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定大鼠血漿中氯沙坦和代謝物EXP3174的濃

6、度，采集血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)，計(jì)算其主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果顯示:一次給藥結(jié)果表明，氯沙坦和丹參片聯(lián)用組與氯沙坦單獨(dú)用藥組相比較，藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(Tmax，t1/2，AUC0-24，AUC0-∞，Vd and CL)均有顯著性差異(p＜0.05)，藥物聯(lián)用后能夠降低氯沙坦原型藥的半衰期清除率及表觀(guān)分布容積并延長(zhǎng)達(dá)峰時(shí)間，說(shuō)明在大鼠體內(nèi)，丹參或其活性成分能夠加快氯沙坦代謝，而代謝物EXP3174的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)與單用藥相比

7、均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明氯沙坦經(jīng)過(guò)聯(lián)用后對(duì)代謝物的影響并不明顯。長(zhǎng)期給藥組結(jié)果表明:藥物經(jīng)過(guò)聯(lián)用后能夠降低氯沙坦原型藥的達(dá)峰濃度、半衰期、清除率及表觀(guān)分布容積，說(shuō)明在大鼠體內(nèi)，丹參或其活性成分能夠誘導(dǎo)氯沙坦代謝。代謝物EXP3174的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)與單用藥相比，半衰期延長(zhǎng)，表觀(guān)分布容積增加表明丹參片對(duì)氯沙坦有一定的誘導(dǎo)作用。長(zhǎng)期給藥結(jié)果與單次給藥結(jié)果相似，表明丹參片能夠影響氯沙坦在體內(nèi)的代謝，且這種影響是一種誘導(dǎo)作用。本文在中西藥聯(lián)合用藥的

8、藥代動(dòng)力學(xué)研究的同時(shí)，采用Chang Liver細(xì)胞為研究模型，進(jìn)行中藥有效成分對(duì)藥物代謝酶系統(tǒng)影響的研究，在細(xì)胞水平闡明丹參制劑影響氯沙坦代謝的分子基礎(chǔ)。研究在Chang Liver細(xì)胞中分別加入不同濃度的丹參酮ⅡA(1，10，100μM)和丹酚酸B(1，10，100μM)，用PCR和western-blot法測(cè)定CYP3A4和CYP2C9的mRNA和蛋白表達(dá)的情況。結(jié)果顯示:丹參酮ⅡA和丹酚酸B作用于Chang Liver細(xì)胞48小

9、時(shí)后，能誘導(dǎo)細(xì)胞中CYP3A4和CYP2C9的mRNA及蛋白表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，且誘導(dǎo)作用呈濃度依賴(lài)性。
　　 本課題以傳統(tǒng)中藥丹參和西藥氯沙坦為研究示范，綜合運(yùn)用藥代動(dòng)力學(xué)，分子生物學(xué)等多學(xué)科手段，將整體分析（中西藥聯(lián)合用藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究）和分子水平分析（中藥有效成分對(duì)藥物代謝酶系統(tǒng)影響的研究）相結(jié)合，從分子-細(xì)胞-整體動(dòng)物水平，創(chuàng)新構(gòu)建基于CYP450酶的系統(tǒng)研究方法，研究丹參制劑對(duì)氯沙坦代謝水平的影