抑制胰島移植物TF的表達對體內(nèi)IBMIR動物模型影響的急性研究.pdf

1、目的:
　　 在臨床胰島移植中,注入門靜脈的胰島與血液接觸,立即發(fā)生一種凝血/炎癥反應(yīng)過程,我們稱之為立即經(jīng)血液介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)(IBMIR),IBMIR是胰島植入后的最早損傷,將導(dǎo)致絕大多數(shù)移植物的丟失和功能損傷,是造成胰島移植早期細胞損傷最重要的原因,而胰島細胞表面的組織因子(tissue factor,TF)是激發(fā)IBMIR凝血反應(yīng)的始動因子。本實驗通過反義RNA技術(shù),干擾組織因子(TF)在豬胰島細胞的表達,對胰島進行預(yù)處理

2、,并建立體內(nèi)IBMIR模型,觀察抑制TF表達后的胰島細胞對移植后IBMIR發(fā)生程度的影響。
　　 方法:
　　 采用反義RNA技術(shù),運用實時定量RT-PCR方法篩選出對TF沉默效果最佳反義RNA,轉(zhuǎn)染新生豬胰島細胞。建立豬胰島細胞經(jīng)門靜脈移植于SCID小鼠的異種IBMIR體內(nèi)模型,將沉默TF表達后的新生豬胰島細胞在IBMIR體內(nèi)模型中各項指標(血糖、C肽、TAT)進行檢測,并取肝臟組織作病理學(xué)檢測,從而觀察IBMIR發(fā)生

3、程度。
　　 結(jié)果:
　　 經(jīng)RT-PCR方法檢測oligoTF-1006對胰島細胞TF沉默效果最佳,其抑制效果在轉(zhuǎn)染后第四天最好。將沉默TF表達后的豬胰島細胞經(jīng)門靜脈移植于SCID小鼠后,其1小時內(nèi)血糖降低程度、C肽值變化、血清TAT值及胰島細胞周圍血栓形成均顯示其IBMIR的發(fā)生程度較對照組、空白轉(zhuǎn)染組明顯減輕。
　　 結(jié)論:
　　 TF作為IBMIR的啟動因子,反義RNA能顯著抑制胰島細胞中TF的表