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1、目的:檢測(cè)白血病患者外周血或骨髓單個(gè)核細(xì)胞BCR-ABL基因的表達(dá)情況,并探討B(tài)CR-ABL基因表達(dá)的臨床意義。探討ph陽性白血病患者ABL激酶區(qū)點(diǎn)突變發(fā)生情況,及在伊馬替尼耐藥患者中的意義。
方法:1應(yīng)用SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)定量RT-PCR法(RQ-PCR)檢測(cè)PH白血病患者BCR-ABL mRNA表達(dá)情況,并對(duì)其臨床特征與BCR-ABL基因表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析。2利用熒光免疫雜交技術(shù)對(duì)的骨髓標(biāo)本進(jìn)行BCR-ABL基
2、因的檢測(cè)。3應(yīng)用巢式RT-PCR對(duì)患者不同時(shí)期的骨髓或血液標(biāo)本進(jìn)行ABL激酶區(qū)擴(kuò)增,對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行純化、測(cè)序以及序列同源性比對(duì),確定點(diǎn)突變的存在和類型。
結(jié)論:白血病患者BCR-ABL mRNA表達(dá)陽性,但表達(dá)水平低于健康人,兩組基因定量比較值RQ。誘導(dǎo)化療獲得CR后表達(dá)水平較治療前治療前后兩者定量比較值RQ為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p), BCR-ABL基因表達(dá)水平與患者性別,年齡,外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù),骨髓中幼稚細(xì)胞比例,有無相關(guān)性,
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