乙酰肝素酶基因多態(tài)性與急性白血病的相關性研究.pdf

1、目的：
　　 肝素酶,屬內β-D-葡萄糖苷酶,能特異性識別、切斷硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)的硫酸肝素(HS)側鏈。HSPG是細胞外基質(ECM)的主要成分之一,在組織構成、血管形成和細胞粘附等方面發(fā)揮著重要的生理作用。高度水化的HS側鏈儲備著大量諸如生長因子、趨化因子和酶類的生物大分子。肝素酶作為HSPG的降解酶,在正常組織中的表達嚴格限制于胎盤和淋巴性器官。然而,最近大量研究證實肝素酶在腫瘤演進轉移過程中發(fā)揮及其重要的作用。

2、因此,研究其基因變異,特別是單核苷酸多態(tài)性,有助于揭示肝素酶基因與急性白血病遺傳易感性、生物學行為和預后的關系,還將引導和推動相關治療藥物的研發(fā),指導個體化預防和治療。本文應用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術,通過病例對照研究探討HPSE基因Arg307Lys多態(tài)位點與急性白血病的相關性。
　　 方法：
　　 實驗對象為125例急性白血病和100例正常人。125例急性白血病患者采自中國醫(yī)科大學

3、附屬第一醫(yī)院血液科2008至2010年住院患者,病理診斷明確。全組平均年齡為54歲,其中男性68例,女性57例。隨機選取100名與病例組同期的健康體檢者作為對照組,平均年齡為56歲,其中男性54例,女性46例,入組條件要求既往無腫瘤病史,并否認有腫瘤家族史。以上所有受檢對象均為中國沈陽地區(qū)無血緣個體,在抽取外周血DNA前均知情同意,并自愿參加本項研究。采用PCR-RFLP法檢測病例組和對照組HPSE基因Arg307Lys多態(tài)位點的基因型

4、。實驗結果均采用SPSS17.0軟件包進行統(tǒng)計分析。
　　 結果：
　　 1、HPSE(Arg307Lys)位點PCR擴增片段為273bp,經(jīng)限制性內切酶BstNI和瓊脂糖凝膠電泳后,基因型AA純合子酶切片段為257bp和16bp條帶,基因型GG純合子酶切片段為192bp,65bp和16bp條帶,基因型AG雜合子酶切片段為257bp,192bp,65bp和16bp條帶。
　　 2、對中國東北地區(qū)正常人群及北愛爾蘭

5、利和以色列人進行比較,各研究群體的HPSE基因Arg307Lys位點各基因型頻率總體分布,均有顯著差異,(X2=5.89,P=0.02)。等位基因頻率的總體分布有顯著差異,(x2=6.46,P=0.04)。亦以GG基因型最常見。
　　 3、急性非淋巴細胞白血病組和正常對照組比較,兩組的基因位點各基因型頻率總體分布均無顯著差異(x2=3.03,P=0.08;等位基因頻率x2=3.15,P=0.08)總體分布均無顯著差異,基因型以G

6、/G型最常見。
　　 4、急性淋巴細胞白血病組和正常對照組比較,兩組基因位點各基因型頻率、等位基因頻率總體分布均無顯著差異(x2=0.07,P=0.79;x2=0.08,P=0.78)。
　　 5、攜帶HPSE(Arg307Lys)突變基因(AA/AA+AG)的個體不增加AML及ALL的發(fā)病風險(AMLx2=0.34,P=0.56,OR=0.49,95％CI0.05～5.31;ALLx2=0.34,P=0.56,OR=2

7、.04,95％CI0.18～22.57)。
　　 結論：
　　 1、我國東北地區(qū)與以色列及北愛爾蘭地區(qū)健康人HPSE(Arg307Lys)基因多態(tài)性研究顯示,各研究群體的HPSE基因Arg307Lys位點各基因型頻率總體分布,均有顯著差異,(x2=5.89,P=0.02)。等位基因頻率的總體分布有顯著差異,(x2=6.46,P=0.04)。
　　 2、HPSE(Arg307Lys)基因多態(tài)性與急性白血病的無顯著相