新型Bcr-Abl和Src-Abl抑制劑抗慢性髓性白血病的實驗研究.pdf

1、慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)是一種血液系統(tǒng)惡性增生性疾病。以細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)嵌合蛋白Bcr-Abl為主要特征。Bcr-Abl蛋白具有持續(xù)活化的酪氨酸激酶活性，激活下游多條信號傳導(dǎo)通路，引起疾病的發(fā)生。 伊馬替尼(Imatinib，Gleevec，STI-571)屬一種Abl酪氨酸激酶抑制劑，它是第一個小分子靶向性治療藥物。體內(nèi)、外實驗表明，Imatinib通過抑制Bcr-Abl自身

2、磷酸化和底物磷酸化，而抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡。Imatinib在臨床上用于費城染色體陽性(Philadelphia chromosome positive，Ph+)的CML患者。由于其所產(chǎn)生的較好血液學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)緩解(尤其是慢性期CML患者)，Imatinib已經(jīng)作為新近診斷的CML患者的一線藥物。但是Imatinib在治療CML急變期及Ph+的急性淋巴細(xì)胞白血病患者時效果卻并不理想，而且隨著臨床的用藥，Imatinib逐漸出現(xiàn)耐藥。

3、因此，這促使人們尋找新的治療CML和Imatinib耐藥的CML的藥物。 AMN107屬第二代Abl抑制劑，許多臨床前研究結(jié)果已經(jīng)顯示出非常好的效果。研究表明，在許多Bcr-Abl轉(zhuǎn)化的造血細(xì)胞系，AMN107對Bcr-Abl自身磷酸化和增殖的抑制較Imatinib高20-50倍。而且AMN107對很多Imatinib耐藥的Bcr-Abl蛋白突變株有很強(qiáng)的抑制作用。目前AMN107正在進(jìn)行臨床試驗，但已有些病例出現(xiàn)AMN107耐

4、藥，其機(jī)制是否與Imatinib耐藥相同還在進(jìn)一步研究中，因此Novartis制藥公司又繼續(xù)研發(fā)更強(qiáng)的Abl抑制劑，其中368485就是Novartis制藥公司研制的一種新型此類化合物，其藥物活性尚沒有相關(guān)報道。 本研究就是探討一種新型苯胺嘧啶類衍生物FAB107在體內(nèi)、外對CML細(xì)胞系K562細(xì)胞和K562耐Imatinib細(xì)胞系K562/G3.0的抑制作用。 本研究采用MTT方法觀察了FAB107與Imatinib和

5、368485相比較對K562和K562/G3.0細(xì)胞的生長抑制作用。研究結(jié)果表明，F(xiàn)AB107抑制K562和K562/G3.0細(xì)胞生長，IC50分別為0.03 μmol/L和0.07 μmol/L。FAB107對2種細(xì)胞的抑制作用強(qiáng)于Imatinib(IC50分別為0.31 μmol/L和6.32μmol/L)，而與368485(IC50分別為0.02 μmol/L和0.082 μmol/L)相當(dāng)。 裸鼠中空纖維模型實驗進(jìn)一步證

6、實，F(xiàn)AB107可以抑制K562和K562/G3.0細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的生長。給藥7天后，與對照組相比，F(xiàn)AB107的3個劑量組(15 μmol/kg、30μmol/kg和45 μmol/kg)在體內(nèi)對K562及K562/G3.0細(xì)胞生長均呈劑量依賴性的抑制作用(P<0.01)，并且抑制強(qiáng)度強(qiáng)于等摩爾濃度的Imatinib，與等摩爾濃度的368485相當(dāng)。 流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明，F(xiàn)AB107可以劑量依賴性地誘導(dǎo)K562和K562/G3

7、.0細(xì)胞凋亡，與等摩爾濃度的368485相當(dāng)。 為了闡明FAB107對K562和K562/G3.0細(xì)胞生長抑制作用的機(jī)制，我們檢測了FAB107對K562和K562/G3.0細(xì)胞Bcr-Ab1蛋白自身磷酸化的抑制作用。FAB107可以明顯抑制K562和K562/G3.0細(xì)胞Bcr-Ab1蛋白自身磷酸化。其作用優(yōu)于等摩爾濃度的Imatinib，與等摩爾濃度的368485相當(dāng)。 總而言之，新型苯胺嘧啶類衍生物FAB107在體