亞硒酸鈉對胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖、凋亡及hTERT表達(dá)的作用及其機(jī)理研究.pdf

1、目的：
　　 探討亞硒酸鈉對人胃癌SGC-7901細(xì)胞株增殖、凋亡和hTERT表達(dá)的作用及其機(jī)理。
　　 方法：
　　 亞硒酸鈉（0、0.5、2.5、5、8μmol/L）的培養(yǎng)液培養(yǎng)SGC-7901細(xì)胞24h、48h、72h、96h，用相差顯微鏡觀察亞硒酸鈉對SGC-7901形態(tài)的影響：MTT法檢測亞硒酸鈉對SGC-7901的增殖的影響；AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測亞硒酸鈉對SGC-7901細(xì)胞凋亡

2、的影響；免疫細(xì)胞化學(xué)SABC法檢測亞硒酸鈉對SGC-7901hTERT蛋白表達(dá)的影響；RT-PCR檢測亞硒酸鈉對SGC-7901細(xì)胞hTERTmRNA水平表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：
　　 在倒置相差顯微鏡下可見空白對照組細(xì)胞呈上皮型貼壁生長，如鋪路石狀，細(xì)胞輪廓清楚，細(xì)胞密集，胞質(zhì)透亮，細(xì)胞生長旺盛，培養(yǎng)液較清澈。在亞硒酸鈉作用下，0.5μmol/L，2.5μmol/L組細(xì)胞形態(tài)無明顯改變。51μmol/L，81μmol

3、/L組，細(xì)胞間接觸變松，貼壁能力減弱，細(xì)胞密度降低，細(xì)胞開始出現(xiàn)脹亡樣改變：細(xì)胞腫脹，輪廓不清，立體感差，胞質(zhì)空泡及顆粒樣物質(zhì)增多，細(xì)胞膜破裂、細(xì)胞崩解成碎片，漂浮于培養(yǎng)液中，隨亞硒酸鈉濃度的升高，上述改變更加明顯。MTT法檢測結(jié)果顯示：隨濃度增加，吸光度值逐漸降低，24h當(dāng)亞硒酸鈉濃度大于2.5μmol/L時，與空白對照組比（）其吸光度值均明顯降低（P<0.01），48h、96h實驗各濃度亞硒酸鈉組與空白對照組螨其吸光度值均明顯降低（

4、P<0.01）。隨濃度的增加，亞硒酸鈉對SGC-7901細(xì)胞增殖抑制率的作用逐漸增加。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示：不同時間點0.5μmol/L，2.5μmol/L亞硒酸鈉組均較空白對照組凋亡發(fā)生率略有升高，5μmol/L、8μmol/L亞硒酸鈉組比空白對照組凋亡率明顯升高（P<0.01）；同一時間點凋亡發(fā)生率隨亞硒酸鈉濃度的增加而升高。免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測結(jié)果顯示：亞硒酸鈉能降低SGC-7901細(xì)胞中（）ERT蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色的平均光密度

5、（MOD），24h時5μmol/L、8μmol/L亞硒酸鈉組與空白對照組比MOD明顯降低（P<0.01），48h時0.5μmol/L、5μmol/L、8μmol/L亞硒酸鈉組與空白對照組比MOD明顯降低（P<0.01），72h時2.5μmol/L、5μmol/L、8μmol/L亞硒酸鈉組與空白對照組比MOD明顯降低（P<0.01），96h時各實驗組與空白對照組比較MOD均明顯降低（P<0.01）。同一時間點，隨亞硒酸鈉濃度的增高h(yuǎn)TER

6、T蛋白MOD逐漸降低。RT-PCR檢測結(jié)果顯示：亞硒酸鈉能降低SGC-7901細(xì)胞中hTERTmRNA的表達(dá)，24h時5μmol/L、8μmol/L亞硒酸鈉組與空白對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），48h，72h，96h時2.5μmol/L、5μmol/L、8μmol/L亞硒酸鈉組與空白對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 亞硒酸鈉能抑制SGC-7901細(xì)胞生長，誘導(dǎo)其凋亡，其發(fā)生可能與下調(diào)