四君子湯拆方對胃癌SGC-7901、BGC-823細胞株側(cè)群細胞增殖、凋亡的影響.pdf

1、目的：以胃癌SGC-7901、BGC-823細胞株通過流式細胞儀技術(shù)分選出的側(cè)群細胞（side population，SP）為研究對象，在四君子湯拆方作用下對兩株細胞的增值、凋亡、周期及凋亡相關(guān)蛋白表達進行檢測，結(jié)合四君子湯全方作用的實驗結(jié)果，闡明四君子湯作用于側(cè)群細胞的機制，并為后續(xù)實驗打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.常規(guī)體外培養(yǎng)人胃癌細胞株高分化胃癌細胞株 MGC-803、中分化胃癌細胞株SGC-7901及低分化胃癌細胞

2、株BGC-823；
　　2.流式細胞儀分選SGC-7901及BGC-823胃癌細胞的SP，并檢測MGC-803細胞株中是否存在SP；
　　3.制備四君子湯各拆方含藥物血清；
　　4. CCK-8法檢測四君子湯拆方藥物血清干預(yù)前后SP細胞與非側(cè)群細胞（Non-side population,NSP）及未分選細胞增殖能力的變化；
　　5.流式細胞儀檢測藥物血清干預(yù)后SP細胞周期及細胞凋亡的變化；
　　6. We

3、stern blot檢測藥物血清干預(yù)后SP細胞中凋亡相關(guān)蛋白Bax及Bcl-2表達的變化情況。
　　結(jié)果：
　　1.對6個樣本的MGC-803細胞進行SP的分選，分選比例均為0％；
　　2.在藥物血清干預(yù)后SP的168h細胞增值倍數(shù)均要低于生理鹽水對照組，差異明顯（p<0.05），且表現(xiàn)為與 NSP相比較高的現(xiàn)象（p<0.05，個別組 p＞0.05），與此同時SP在藥物血清干預(yù)后的增值抑制率低于NSP，差異較明顯（p<

4、0.05）；
　　3.隨著藥物血清作用時間的延長，SP細胞的凋亡率逐漸升高（p<0.05），且大體表現(xiàn)出與NSP相比凋亡率較低的現(xiàn)象（p<0.05，個別組p＞0.05）；
　　4.隨著藥物血清干預(yù)時間的延長，SP與對照組相比G1期逐步升高，G2期及S期逐步降低，藥物血清干預(yù)后SP的G1期低于NSP，G2期及S期高于NSP，以上比較差異較明顯（p<0.05，個別組p＞0.05）；
　　5.隨著藥物血清作用時間延長，SP的

5、Bax蛋白的表達與對照組相比逐漸升高，且總體呈現(xiàn)與NSP相比較低的現(xiàn)象（p<0.05，個別組p＞0.05），Bcl-2蛋白的表達與對照組相比逐漸降低，且總體呈現(xiàn)與NSP相比較高的現(xiàn)象（p<0.05，個別組p＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.四君子湯各拆方藥物血清可以抑制胃癌SP細胞增殖，抑制增值機制為細胞周期的改變；
　　2.四君子湯各拆方藥物血清可以促進胃癌SP細胞凋亡，促凋亡機制為促凋亡蛋白Bax的表達上調(diào)和抑凋