補(bǔ)腎和益氣對哮喘大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)若干指標(biāo)影響的對比研究.pdf

1、目的： 研究支氣管哮喘(以下簡稱哮喘)反復(fù)發(fā)作大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)(neuro-endocrino-immunenetwork,NEI)若干指標(biāo)的變化；對比觀察補(bǔ)腎(淫羊藿)和益氣(黃芪)對哮喘反復(fù)發(fā)作大鼠NEI相關(guān)指標(biāo)的影響。 方法： 造模及分組：健康清潔級雄性挪威(BrownNorway，BN)大鼠，120只，體重180一220g。分為11組，每組11只(其中正常對照組10只)。X組：哮喘對照組：第0天用l

2、mLAL(OH)3凝膠、6×109個滅活百日咳桿菌疫苗和lOOmg卵蛋白混懸液進(jìn)行致敏，第14天用濃度為5％的卵蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行激發(fā)，每天1次，連續(xù)7天，緩解7天，再激發(fā)7天，從緩解第1天起，開始用生理鹽水進(jìn)行灌胃，連續(xù)14天；Y組：正常對照組：用生理鹽水代替卵蛋白生理鹽水，余同X組；A組：低劑量補(bǔ)腎益氣復(fù)方(淫羊藿和黃芪，以下簡稱復(fù)方)組；B組：中劑量復(fù)方組；C組：高劑量復(fù)方組；D組：低劑量淫羊藿(EpimediumHerb)組；

3、E組：中劑量淫羊藿組；F組：高劑量淫羊藿組；L組：低劑量黃芪(MilkvetchRoot)組；M組：中劑量黃芪組：N組：高劑量黃芪組。A、B、C、D、E、F、L、M、N組分別以不同劑量的中藥煎劑2mL代替生理鹽水進(jìn)行灌胃，余同X組。 標(biāo)本采集及檢測：所有大鼠均在上午8：30至10：30在最后一次激發(fā)后30分鐘內(nèi)麻醉，采取下丘腦、血、肺組織等標(biāo)本。用Realtime-PCR法檢測下丘腦促腎上腺激素釋放激素(CRH)mRNA的表達(dá)；

4、放免法檢測血漿中促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)的濃度；酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測IL-4，IL-6，IFN．γ和皮質(zhì)酮(CORT)；肺組織采用HE染色法。 結(jié)果： 1．哮喘反復(fù)發(fā)作大鼠NEI若干指標(biāo)的變化： 1．1HPA軸的變化： 與正常對照組比較，哮喘組下丘腦CRHmRNA表達(dá)有升高趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義；血漿ACTH濃度無顯著變化(p>0．05)：血清皮質(zhì)酮明顯升高(p<0．05)。 1．

5、2細(xì)胞因子的變化： 與正常對照組比較，哮喘組血清IL-4和IL-6均有升高趨勢，但未顯示出統(tǒng)計學(xué)意義，IFN-y未見明顯變化。 2．補(bǔ)腎和益氣藥對哮喘大鼠HPA軸的調(diào)節(jié)作用： 2．1對下丘腦CRHmRNA表達(dá)的影響： 2．1．1復(fù)方的影響：與哮喘組比較，低劑量組無明顯改變，中、高劑量組均明顯升高(p<0．01)。 2．1．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中劑量組均明顯升高(p<0．01)，高劑量

6、組無明顯變化。三個劑量組之間比較無統(tǒng)計學(xué)意義的變化。 2．1．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。 2．1．4各藥物組之間比較：高劑量復(fù)方組較高劑量淫羊藿組明顯升高(P<0．05)，高劑量復(fù)方組較高劑量黃芪組明顯升高(P<0．01)，高劑量淫羊藿組較高劑量黃芪組明顯升高(P<0．05)。 2．2對血漿ACTH的影響： 23．1復(fù)方的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量復(fù)方組均無顯著變化

7、。 2．3．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量淫羊藿組均無顯著變化。 2．3．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量黃芪組均無顯著變化。 2．3．4各藥物之間比較：高劑量復(fù)方組較高劑量黃芪組顯著升高(p<0．05)，高劑量淫羊藿組較高劑量黃芪組顯著升高(p<0．05)，高劑量復(fù)方組與高劑量淫羊藿組比較，無顯著變化。 2．3對血清皮質(zhì)酮的影響： 2．4．1黃芪和淫羊藿復(fù)方的影響：與哮喘

8、組比較，低、中、高劑量復(fù)方組均無顯著變化。 2．4．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量淫羊藿組均無顯著變化。 2．4．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低劑量黃芪組顯著升高(p<0．01)，中、高劑量黃芪組無顯著變化。與低劑量黃芪組比較，中劑量黃芪組顯著降低(p<0．05)，高劑量黃芪組顯著降低(p<0．01)。 2．4．4各藥物之間比較：低劑量黃芪組較低劑量淫羊藿組顯著升高(p<0．05)，低劑量黃芪組較低

9、劑量復(fù)方組顯著升高(p<0．05)。高劑量黃芪組、高劑量淫羊藿組、高劑量復(fù)方組之間無顯著不同。 3．補(bǔ)腎和益氣藥對幾個相關(guān)細(xì)胞因子的影響： 3．1對IL-4的影響： 3．1．1黃芪和淫羊藿復(fù)方的影響：與哮喘組比較，中劑量復(fù)方組顯著升高(p<0．05)，低、高劑量復(fù)方組均無顯著變化。 3．1．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量淫羊藿組均無顯著變化。 3．1.3黃芪的影響：與哮喘組比較，高劑

10、量黃芪組顯著降低(p<0．05)，而低、中劑量組均無明顯變化。與低、中劑量組比較，高劑量組顯著降低(p<0．01)。3．1．4各藥物之間比較：高劑量黃芪組較高劑量淫羊藿組(p<0．05)和高劑量復(fù)方組(p<0．01)均顯著降低，高劑量復(fù)方組與高劑量淫羊藿組比較，顯著升高(p<0．05)。 3．2對IFN-~的影響： 3．2．1黃芪和淫羊藿復(fù)方的影響：與哮喘組比較，高劑量組明顯升高(p<0．05)，低、中劑量組無顯著變化。

11、 3．2．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，中劑量組明顯升高，低、高劑量組無顯著變化。 3．2．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。 3．2．4各藥物之間比較：高劑量復(fù)方組較高劑量淫羊藿組明顯升高(p<0．05)。高劑量復(fù)方組與中劑量淫羊藿組比較，無顯著變化。高劑量復(fù)方組與高劑量黃芪組比較，無顯著變化。高劑量淫羊藿組與高劑量黃芪組比較，無明顯變化。 3．3對IL-6的影響： 3．

12、3．1黃芪和淫羊藿復(fù)方的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。與正常對照組比較，中、高劑量組顯著升高(p<0．05)。 3．3．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。3．3．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中劑量組無明顯變化，高劑量組顯著降低(p<0．05)。與低、中劑量組比較，高劑量組顯著降低。 3．3．4各藥物之間比較：高劑量黃芪組較高劑量復(fù)方組(p<0．05)和高劑量淫羊藿組(p<

13、0．05)顯著降低，高劑量淫羊藿組和高劑量復(fù)方組比較，無顯著變化。 4．肺組織Eos浸潤的變化： 與正常對照組比較，哮喘組Eos改變明顯哮喘組大鼠肺組織Eos浸潤程度明顯較正常組為重(p<0．01)，低、中劑量黃芪組較哮喘組顯著減輕(p<0．01)。其余各組無顯著改變。 結(jié)論： 哮喘反復(fù)發(fā)作3周的大鼠存在NEI(本實驗主要涵蓋了HPA軸和若干細(xì)胞因子)的紊亂；補(bǔ)腎、益氣、和補(bǔ)腎益氣復(fù)方三種制劑中，補(bǔ)腎和益