補腎和益氣對哮喘大鼠神經內分泌免疫網絡若干指標影響的對比研究.pdf

1、目的： 研究支氣管哮喘(以下簡稱哮喘)反復發(fā)作大鼠神經內分泌免疫網絡(neuro-endocrino-immunenetwork,NEI)若干指標的變化；對比觀察補腎(淫羊藿)和益氣(黃芪)對哮喘反復發(fā)作大鼠NEI相關指標的影響。 方法： 造模及分組：健康清潔級雄性挪威(BrownNorway，BN)大鼠，120只，體重180一220g。分為11組，每組11只(其中正常對照組10只)。X組：哮喘對照組：第0天用l

2、mLAL(OH)3凝膠、6×109個滅活百日咳桿菌疫苗和lOOmg卵蛋白混懸液進行致敏，第14天用濃度為5％的卵蛋白生理鹽水溶液進行激發(fā)，每天1次，連續(xù)7天，緩解7天，再激發(fā)7天，從緩解第1天起，開始用生理鹽水進行灌胃，連續(xù)14天；Y組：正常對照組：用生理鹽水代替卵蛋白生理鹽水，余同X組；A組：低劑量補腎益氣復方(淫羊藿和黃芪，以下簡稱復方)組；B組：中劑量復方組；C組：高劑量復方組；D組：低劑量淫羊藿(EpimediumHerb)組；

3、E組：中劑量淫羊藿組；F組：高劑量淫羊藿組；L組：低劑量黃芪(MilkvetchRoot)組；M組：中劑量黃芪組：N組：高劑量黃芪組。A、B、C、D、E、F、L、M、N組分別以不同劑量的中藥煎劑2mL代替生理鹽水進行灌胃，余同X組。 標本采集及檢測：所有大鼠均在上午8：30至10：30在最后一次激發(fā)后30分鐘內麻醉，采取下丘腦、血、肺組織等標本。用Realtime-PCR法檢測下丘腦促腎上腺激素釋放激素(CRH)mRNA的表達；

4、放免法檢測血漿中促腎上腺皮質激素(ACTH)的濃度；酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測IL-4，IL-6，IFN．γ和皮質酮(CORT)；肺組織采用HE染色法。 結果： 1．哮喘反復發(fā)作大鼠NEI若干指標的變化： 1．1HPA軸的變化： 與正常對照組比較，哮喘組下丘腦CRHmRNA表達有升高趨勢，但無統(tǒng)計學意義；血漿ACTH濃度無顯著變化(p>0．05)：血清皮質酮明顯升高(p<0．05)。 1．

5、2細胞因子的變化： 與正常對照組比較，哮喘組血清IL-4和IL-6均有升高趨勢，但未顯示出統(tǒng)計學意義，IFN-y未見明顯變化。 2．補腎和益氣藥對哮喘大鼠HPA軸的調節(jié)作用： 2．1對下丘腦CRHmRNA表達的影響： 2．1．1復方的影響：與哮喘組比較，低劑量組無明顯改變，中、高劑量組均明顯升高(p<0．01)。 2．1．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中劑量組均明顯升高(p<0．01)，高劑量

6、組無明顯變化。三個劑量組之間比較無統(tǒng)計學意義的變化。 2．1．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。 2．1．4各藥物組之間比較：高劑量復方組較高劑量淫羊藿組明顯升高(P<0．05)，高劑量復方組較高劑量黃芪組明顯升高(P<0．01)，高劑量淫羊藿組較高劑量黃芪組明顯升高(P<0．05)。 2．2對血漿ACTH的影響： 23．1復方的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量復方組均無顯著變化

7、。 2．3．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量淫羊藿組均無顯著變化。 2．3．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量黃芪組均無顯著變化。 2．3．4各藥物之間比較：高劑量復方組較高劑量黃芪組顯著升高(p<0．05)，高劑量淫羊藿組較高劑量黃芪組顯著升高(p<0．05)，高劑量復方組與高劑量淫羊藿組比較，無顯著變化。 2．3對血清皮質酮的影響： 2．4．1黃芪和淫羊藿復方的影響：與哮喘

8、組比較，低、中、高劑量復方組均無顯著變化。 2．4．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量淫羊藿組均無顯著變化。 2．4．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低劑量黃芪組顯著升高(p<0．01)，中、高劑量黃芪組無顯著變化。與低劑量黃芪組比較，中劑量黃芪組顯著降低(p<0．05)，高劑量黃芪組顯著降低(p<0．01)。 2．4．4各藥物之間比較：低劑量黃芪組較低劑量淫羊藿組顯著升高(p<0．05)，低劑量黃芪組較低

9、劑量復方組顯著升高(p<0．05)。高劑量黃芪組、高劑量淫羊藿組、高劑量復方組之間無顯著不同。 3．補腎和益氣藥對幾個相關細胞因子的影響： 3．1對IL-4的影響： 3．1．1黃芪和淫羊藿復方的影響：與哮喘組比較，中劑量復方組顯著升高(p<0．05)，低、高劑量復方組均無顯著變化。 3．1．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量淫羊藿組均無顯著變化。 3．1.3黃芪的影響：與哮喘組比較，高劑

10、量黃芪組顯著降低(p<0．05)，而低、中劑量組均無明顯變化。與低、中劑量組比較，高劑量組顯著降低(p<0．01)。3．1．4各藥物之間比較：高劑量黃芪組較高劑量淫羊藿組(p<0．05)和高劑量復方組(p<0．01)均顯著降低，高劑量復方組與高劑量淫羊藿組比較，顯著升高(p<0．05)。 3．2對IFN-~的影響： 3．2．1黃芪和淫羊藿復方的影響：與哮喘組比較，高劑量組明顯升高(p<0．05)，低、中劑量組無顯著變化。

11、 3．2．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，中劑量組明顯升高，低、高劑量組無顯著變化。 3．2．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。 3．2．4各藥物之間比較：高劑量復方組較高劑量淫羊藿組明顯升高(p<0．05)。高劑量復方組與中劑量淫羊藿組比較，無顯著變化。高劑量復方組與高劑量黃芪組比較，無顯著變化。高劑量淫羊藿組與高劑量黃芪組比較，無明顯變化。 3．3對IL-6的影響： 3．

12、3．1黃芪和淫羊藿復方的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。與正常對照組比較，中、高劑量組顯著升高(p<0．05)。 3．3．2淫羊藿的影響：與哮喘組比較，低、中、高劑量組均無顯著變化。3．3．3黃芪的影響：與哮喘組比較，低、中劑量組無明顯變化，高劑量組顯著降低(p<0．05)。與低、中劑量組比較，高劑量組顯著降低。 3．3．4各藥物之間比較：高劑量黃芪組較高劑量復方組(p<0．05)和高劑量淫羊藿組(p<

13、0．05)顯著降低，高劑量淫羊藿組和高劑量復方組比較，無顯著變化。 4．肺組織Eos浸潤的變化： 與正常對照組比較，哮喘組Eos改變明顯哮喘組大鼠肺組織Eos浸潤程度明顯較正常組為重(p<0．01)，低、中劑量黃芪組較哮喘組顯著減輕(p<0．01)。其余各組無顯著改變。 結論： 哮喘反復發(fā)作3周的大鼠存在NEI(本實驗主要涵蓋了HPA軸和若干細胞因子)的紊亂；補腎、益氣、和補腎益氣復方三種制劑中，補腎和益