中藥更年春方對(duì)去勢(shì)大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫功能影響的觀察.pdf

1、隨著社會(huì)的老齡化，圍絕經(jīng)期綜合征的發(fā)病率也隨之升高，神經(jīng)內(nèi)分泌免疫功能的紊亂被認(rèn)為是其發(fā)病的根本。目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)圍絕經(jīng)期綜合征主要采用激素替代療法進(jìn)行治療，但因其副作用及禁忌癥限制了其在臨床上的應(yīng)用。近年來(lái)因中藥治療圍絕經(jīng)期綜合征副作用小，而療效顯著，已逐漸成為圍絕經(jīng)期綜合征的主要治療方法。中藥更年春方(GNC)是我院根據(jù)中醫(yī)理論及多年臨床實(shí)踐而研制，在治療圍絕經(jīng)期綜合征方面已取得良好療效，因此有必要研究GNC對(duì)圍絕經(jīng)期綜合征的治療機(jī)制

2、。本研究擬通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)研究，從神經(jīng)內(nèi)分泌免疫功能角度出發(fā)，探討GNC對(duì)圍絕經(jīng)期綜合征的治療機(jī)制，為GNC用于臨床提供有效的科學(xué)依據(jù)。
　　第一部分中藥更年春方對(duì)去勢(shì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響
　　目的:觀察GNC對(duì)去勢(shì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，探討GNC對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響機(jī)制。
　　方法:本研究實(shí)驗(yàn)分7組。3月齡SD雌性大鼠去勢(shì)(OVX)后隨機(jī)分組，灌服中藥復(fù)方GNC作為OVX+GNC組（實(shí)驗(yàn)組），灌服戊酸雌二醇作為OVX

3、+ E2組（陽(yáng)性對(duì)照組），灌服生理鹽水作為OVX+NS組（模型組）;手術(shù)過(guò)程相同但不去勢(shì)的SD雌性大鼠即假手術(shù)（Sham）后隨機(jī)分組，灌服GNC為Sham+GNC組，灌服生理鹽水為Sham+NS組;未行任何手術(shù)的SD雌性大鼠即正常(NC)后隨機(jī)分組，灌服生理鹽水作為NC+NS組，不灌任何藥物大鼠作為NC組。灌藥3個(gè)月后經(jīng)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
　　結(jié)果:
　　(1)在Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中定位航

4、行能力測(cè)試(place navigation performance，PNP)中，OVX+NS組與NC+NS組、NC組比較，逃避潛伏期(escapelatent period，ELP)時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.05);OVX+GNC組、OVX+E2組與OVX+NS組比較，ELP時(shí)間明顯縮短(P＜0.05);Sham+GNC組與Sham+NS組、NC組比較ELP時(shí)間明顯延長(zhǎng)(P＜0.05); OVX+E2組與OVX+GNC組比較，ELP無(wú)明顯

5、差異(P＜0.05)。
　　(2)在空間探索能力測(cè)試(spatial probe performance，SPP)中，OVX+NS組與NC+NS組及NC組比較，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少(P＜0.05); OVX+GNC組、OVX+E2組與OVX+NS組比較，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯增多(P＜0.05);Sham+GNC組與Sham+NS組及NC組比較，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少(P＜0.05);OVX+E2組與OVX+GNC組比較，穿越平臺(tái)次數(shù)無(wú)明

6、顯差異(P＜0.05)。在探索軌跡圖中，OVX+NS組與NC+NS組及NC組比較，探索軌跡呈現(xiàn)無(wú)規(guī)律分布;OVX+GNC組、OVX+E2組與OVX+NS組比較，探索軌跡明顯集中分布于平臺(tái)所在位置附近;Sham+GNC組與Sham+NS組及NC組比較，探索軌跡呈現(xiàn)無(wú)規(guī)律分布;OVX+E2組與OVX+GNC組比較，探索軌跡的分布無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:去勢(shì)會(huì)導(dǎo)致大鼠學(xué)習(xí)記憶能力減退;GNC可提高去勢(shì)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，效果與E2類(lèi)似;

7、未去勢(shì)大鼠灌服GNC反而導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力減退。
　　第二部分中藥更年春方對(duì)去勢(shì)大鼠神經(jīng)遞質(zhì)、細(xì)胞因子、瘦素及子宮內(nèi)膜的影響
　　目的:觀察GNC對(duì)去勢(shì)大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫功能的影響，探討GNC對(duì)圍絕經(jīng)期綜合征的治療機(jī)制。
　　方法:本研究實(shí)驗(yàn)分8組。3月齡SD雌性大鼠去勢(shì)(OVX)后隨機(jī)分組，灌服中藥復(fù)方GNC高劑量（OVX+GNCH組）、灌服中藥復(fù)方GNC顆粒制劑中劑量（OVX+GNCM組）、灌服中藥復(fù)方GNC顆粒制劑

8、低劑量（OVX+GNCL組）作為實(shí)驗(yàn)組，灌服戊酸雌二醇高劑量（OVX+ EH組）、灌服戊酸雌二醇低劑量（OVX+ EL組）作為陽(yáng)性對(duì)照組，灌服雙蒸水（OVX+D組）作為模型組。手術(shù)過(guò)程相同但不去勢(shì)的SD雌性大鼠即假手術(shù)（Sham）隨機(jī)分組，以灌服中藥復(fù)方GNC中劑量作為Sham+GNCM組、灌服雙蒸水作為Sham+D組。灌藥30天各組大鼠測(cè)體重后，經(jīng)心臟采血處死后，取大鼠大腦后分離下丘腦，檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)(NE、DA、5-HT、5-HIAA

9、)水平;取大鼠血清檢測(cè)細(xì)胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、IFN-γ）水平、Leptin水平、E2水平;取大鼠子宮檢測(cè)子宮內(nèi)膜厚度。
　　結(jié)果:
　　(1) OVX+D組與Sham各組比較，大鼠下丘腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)NE、DA含量明顯降低(P＜0.05)，5-HT、5-HIAA含量、5-HT/NE、5-HT/DA比值明顯升高(P＜0.05); OVX+GNCH組、OVX+GNCM組、OVX+ EH組與OVX+D組

10、比較，下丘腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)NE含量明顯降低(P＜0.05)。OVX+GNC各組、OVX+E各組與OVX+D組比較，大鼠下丘腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)DA含量明顯升高(P＜0.05)、5-HT、5-HIAA含量明顯降低(P＜0.05)、5-HT/NE、5-HT/DA比值明顯下降(P＜0.05);OVX+GNC各組與OVX+E各組比較，大鼠下丘腦神經(jīng)遞質(zhì)之間均無(wú)明顯差異。OVX+GNCH組、OVX+ EH組與OVX+GNCM組、OVX+GNCL組比較，大鼠下

11、丘腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)5-HT含量明顯降低(P＜0.05)，5-HT/NE、5-HT/DA比值明顯下降(P＜0.05)。
　　(2) OVX+D組與Sham各組比較，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明顯升高(P＜0.05)，血清IL-2、IFN-γ水平明顯降低(P＜0.05);OVX+GNC各組、OVX+E各組與OVX+D組比較，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明顯降低(P＜0.05)，血清IL-2、IFN-γ水平明顯升高

12、(P＜0.05); OVX+GNC各組與OVX+E各組比較，血清細(xì)胞因子的含量之間均無(wú)明顯差異。OVX+GNCH組與OVX+GNCL組比較，血清IFN-γ水平明顯升高(P＜0.05);OVX+EH組與OVX+ EL組比較，血清IFN-γ水平明顯升高(P＜0.05)。
　　(3)灌藥前各組體重之間無(wú)明顯差異。灌藥后OVX+D組與Sham各組比較，體重明顯增加(P＜0.05)，血清leptin水平明顯升高(P＜0.05); OVX+G

13、NC各組、OVX+E各組與OVX+D組比較，體重明顯降低(P＜0.05)，血清leptin水平明顯降低(P＜0.05);OVX+GNC各組與OVX+E各組比較，體重及血清leptin水平均無(wú)明顯差異。
　　(4) OVX+D組與Sham各組比較，血清E2水平明顯降低(P＜0.01)，子宮內(nèi)膜厚度明顯變薄(P＜0.01); OVX+GNC各組與OVX+D組比較，血清E2水平無(wú)明顯差異，子宮內(nèi)膜厚度無(wú)明顯差異;OVX+E各組與OVX+