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文檔簡介
1、背景與目的:
冠狀動脈缺血引起的缺血性心臟病,是心血管系統(tǒng)疾病的主要死亡原因。急性心肌梗死后,即使成功溶栓或行PTCA、CABG等治療使冠狀動脈再通,也會由于再灌注損傷而使心功能減退。故保護(hù)缺血心肌細(xì)胞壽命和功能,減輕缺血再灌注心肌損傷,仍是心臟病的研究熱點。白藜蘆醇有抗氧化、清除自由基,抑制凋亡等積極作用,能防止動脈粥樣硬化、防治冠心病。白藜蘆醇的心臟保護(hù)作用及作為沉寂信息調(diào)節(jié)因子2(silent information r
2、egulator2,SIR2)酶激活劑,延長細(xì)胞壽命的作用近年來受到廣泛的關(guān)注。本實驗建立大鼠缺血再灌注模型,觀察白藜蘆醇對心肌缺血再灌注損傷、心肌細(xì)胞凋亡及SIRT1(SIR2同源基因)、半胱天冬蛋白酶3(Caspase3)表達(dá)的影響,探討白藜蘆醇對在體心肌缺血再灌注損傷作用的可能機(jī)制。
方法:
雄性Sprague Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為3組,即假手術(shù)組、缺血再灌注組和白藜蘆醇組,每組10只。白藜蘆醇組和
3、缺血再灌注組大鼠結(jié)扎左冠狀動脈制備心肌缺血再灌注模型,30 min后松開結(jié)扎線,再灌注2 h。假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎。白藜蘆醇組給予10 mg/kg白藜蘆醇,假手術(shù)組及缺血再灌注組給予二甲基亞砜溶液,分別于缺血前15 min及再灌注前1 min舌下靜脈給藥。實驗過程監(jiān)測肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖和血流動力學(xué)指標(biāo),觀察心律失常的發(fā)生情況。實驗結(jié)束取出心臟,進(jìn)行心肌組織MDA含量及SOD活性測定、蘇木精-伊紅(HE)染色、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dU
4、TP缺口末端標(biāo)記(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)檢測、免疫組織化學(xué)檢測。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x±s)表示,采用SPSS13.0 for windows軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。
結(jié)果:
(1)再灌注期間,缺血再灌注組室速、室顫及其它心律失常發(fā)生比例高,心律失常評分(5.00±2.83)升高,有2例因再灌
5、注后嚴(yán)重心律失常而死亡。白藜蘆醇組心律失常發(fā)生比例較缺血再灌注組下降,心律失常評分(2.70±2.11)與缺血再灌注組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
(2)與假手術(shù)組相比,缺血再灌注組及白藜蘆醇組的左心室收縮壓(LVSP)及左心室內(nèi)壓最大變化速率(±dp/dtmax)在缺血30min及再灌注2h均明顯降低(P<0.01)。再灌注2h后,白藜蘆醇組的-dp/dtmax較缺血再灌注組升高(P<0.05)。
(3)
6、與假手術(shù)組比較,缺血再灌注組與白藜蘆醇組心肌組織 MDA含量增加,SOD活性降低,差異均有顯著性意義(P<0.01)。與缺血再灌注組比較,白藜蘆醇組MDA含量明顯減少,SOD活性升高,差異均有顯著性意義(P<0.01)。
(4)對SIRT1陽性細(xì)胞指數(shù)、心肌細(xì)胞凋亡凋亡指數(shù),三組觀察結(jié)果不同(F=54.791,p=0.000)。白藜蘆醇組大鼠心肌細(xì)胞的SIRT1陽性細(xì)胞指數(shù)顯著高于缺血再灌注組(P<0.01),心肌細(xì)胞的凋亡指
7、數(shù)顯著低于缺血再灌注組(P<0.01)。
(5)白藜蘆醇組Caspase3灰度值為27.40±1.87;缺血再灌注組灰度值為34.69±1.71,著色強(qiáng)度顯著高于白藜蘆醇組(P<0.01)。
結(jié)論:
白藜蘆醇具有減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷的心臟保護(hù)作用,表現(xiàn)為減少惡性心律失常的發(fā)生;減少心肌細(xì)胞凋亡;改善心功能。白藜蘆醇對缺血再灌注心肌的保護(hù)作用可能與其抗氧化特性以及增加SIR2表達(dá),抑制Caspase3表
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