新冠心蘇合活血方對(duì)大鼠離體心臟及血管變力作用的研究.pdf

1、冠心病心絞痛是冠狀動(dòng)脈供血不足,心肌急劇的、暫時(shí)缺血與缺氧所引起的以發(fā)作性胸痛或胸部不適為主要表現(xiàn)的臨床綜合癥。新冠心蘇合活血方遵循中醫(yī)理論,選用蘇合香、冰片、乳香、檀香四藥組成,具有芳香開(kāi)竅、活血止痛作用,常用治冠心病心絞痛急性發(fā)作。
　　 課題組前期針新冠心蘇合活血方的藥效學(xué),分別對(duì)采用Pit或ISO復(fù)制的小鼠、大鼠實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血模型進(jìn)行相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)果顯示該方對(duì)Pit或ISO導(dǎo)致的大鼠/小鼠實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血模型均

2、有較好的保護(hù)作用,其機(jī)制可能與抑制自由基的脂質(zhì)過(guò)氧化,保護(hù)和改善內(nèi)皮功能,舒張冠脈血管等有關(guān)。同時(shí),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,新冠心蘇合活血方能明顯降低異ISO所致的心電圖J點(diǎn)和P波的改變,縮小心肌缺血范圍有較好的抗心肌缺血作用;能明顯降低血清GOT活性(P＜0.05,P＜0.01),減輕膜損傷,保護(hù)膜結(jié)構(gòu)和心肌細(xì)胞,抑制心肌酶外漏;能使心肌SOD活性明顯升高,MDA含量明顯降低,以減輕脂質(zhì)過(guò)氧化損傷,防止心肌細(xì)胞壞死,從而發(fā)揮抗心肌缺血損傷的作用

3、。新冠心蘇合活血方還能使血清NO含量顯著升高,有效保護(hù)和改善內(nèi)皮功能,促進(jìn)NO的產(chǎn)生與釋放,舒張血管而發(fā)揮抗心肌缺血作用。新冠心蘇合活血方能明顯降低ISO復(fù)制的心肌缺血模型大鼠血清GOT含量,提高心肌勻漿組織中NO含量、NO活性,降低MDA含量,對(duì)實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血有一定的保護(hù)作用。
　　 鑒于前期研究情況,本實(shí)驗(yàn)著重觀察新冠心蘇合活血方對(duì)動(dòng)物離體心臟、血管變力作用。分別選用離體大鼠、小鼠、家兔等心臟、胸、腹主動(dòng)血管進(jìn)行實(shí)驗(yàn),目

4、的在于研究該藥對(duì)心臟、血管的直接作用。而離體心臟標(biāo)本的復(fù)制方法較成熟,且穩(wěn)定性好,不受心率、動(dòng)脈血管收縮、擴(kuò)張和神經(jīng)體液調(diào)節(jié)等因素的影響;觀察心肌收縮性能的改變較完整心臟更簡(jiǎn)便,適合觀察藥物對(duì)心臟的直接作用。心肌收縮力大小不僅受心肌前后負(fù)荷的影響,還受Ca濃度、葡萄糖、脂肪酸代謝等心肌細(xì)胞自身代謝活動(dòng)的影響,心功能的決定因素有前負(fù)荷、后負(fù)荷、心肌收縮力、心率,離體心臟實(shí)驗(yàn)?zāi)茉谄渌蛩毓潭l件下對(duì)其中一個(gè)因素進(jìn)行評(píng)價(jià)。離體胸、腹主動(dòng)脈血管

5、實(shí)驗(yàn),在其它因素不變的條件下,可以更加直觀地觀察血管的反應(yīng)性,故本實(shí)驗(yàn)采用離體動(dòng)物心臟、血管進(jìn)行相關(guān)實(shí)研究。
　　 第一部分新冠心蘇合活血方對(duì)動(dòng)物離體心臟變力作用的研究
　　 目的:觀察新冠心蘇合活血方對(duì)大鼠、小鼠、家兔離體心臟變力作用
　　 方法:分別選取wistar大鼠、小鼠、家兔各20只。給予全價(jià)營(yíng)養(yǎng)飼料,自由進(jìn)食飲水,喂養(yǎng)一周后,分別用10％烏拉坦(lg/kg)腹腔注射麻醉,迅速開(kāi)胸,剪斷與心臟相連的大血

6、管,分別取出大鼠、小鼠、家兔心臟,放于盛有充氧的低溫krebs液中,輕壓心臟將其內(nèi)殘留血液擠出,截取左、右心房,用絲線一端固定于盛有20ml經(jīng)95％02+5％CO2混合氣體持續(xù)飽和的Krebs液的麥?zhǔn)喜鄣撞?另一端連接張力換能器,用超級(jí)恒溫槽水浴循環(huán)維持在34.5-35.5℃左右,調(diào)整給予的前負(fù)荷,直至心肌收縮力達(dá)最大值,平衡15分鐘。用10-8mol/L的鈣離子激活標(biāo)本,連續(xù)三次后,給予新冠心蘇合活血方藥濃度在100mg/l(相當(dāng)給藥

7、0.02ml),15分鐘后用Krebs液沖洗3次,平衡15分鐘。如上法分別再給予新冠心蘇合活血方不同濃度150mg/l(相當(dāng)給藥量0.03ml)、200mg/l(相當(dāng)給藥量0.04ml)、250mg/l(相當(dāng)給藥量0.05ml)，采用MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析儀,系統(tǒng)采集不同濃度新冠心蘇合活血方對(duì)心房肌張力變化數(shù)據(jù),并分析其作用。
　　 結(jié)果:(1)新冠心蘇合活血方對(duì)大鼠離體心肌收縮力和心搏頻率隨著給藥濃度的增加其

8、作用降低。當(dāng)濃度100mg/l時(shí)其作用不甚明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時(shí),其該藥在降低大鼠離體心肌收縮力,減慢心搏頻率明顯增強(qiáng)(p＜0.05或p＜0.01)。(2)新冠心蘇合活血方對(duì)小鼠離體心肌收縮力和心搏頻率隨著給藥濃度的增加其作用降低。當(dāng)濃度100mmg/l時(shí)其作用不明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時(shí),其該藥在降低小鼠離體心肌收縮力,減慢心搏頻率

9、明顯增強(qiáng)(p＜0.05或p＜0.01)。(3)新冠心蘇合活血方對(duì)家兔離體心肌收縮力和心搏頻率隨著給藥濃度的增加其作用降低。當(dāng)濃度100mg/l時(shí)其作用不明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時(shí),其該藥在降低家兔離體心肌收縮力,減慢心搏頻率明顯增強(qiáng)(p＜0.05或p＜0.01)。
　　 結(jié)論:(1)新冠心蘇合活血方對(duì)大鼠、小鼠、家兔離體心肌收縮力和心博均有降低心臟收縮力,減慢心搏頻率作用,從而可

10、改善或消除冠心病心絞痛癥狀。(2)當(dāng)該藥濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時(shí),其降低動(dòng)物離體心臟收縮力,減慢心搏頻率作用明顯增強(qiáng)。
　　 第二部分新冠心蘇合活血方對(duì)動(dòng)物離體血管變力作用的研究
　　 目的:觀察新冠心蘇合活血方對(duì)大鼠離體血管變力作用
　　 方法:選取wistar大鼠20只,雌雄各半,體重180±20g,于清潔級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng),室溫22-26℃,給予全價(jià)營(yíng)養(yǎng)飼料,自由進(jìn)食飲水,喂養(yǎng)一周后

11、,用10％烏拉坦(1g/kg)腹腔注射麻醉,迅速取出胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈,放于盛有充氧的低溫krebs液中,盡量去除動(dòng)脈周?chē)Y(jié)締組織,剪成0.7-1.4cm長(zhǎng)的血管環(huán),用兩個(gè)不銹鋼細(xì)絲制成的三角形別針穿過(guò)血管環(huán),用絲線一端固定于盛有20ml經(jīng)95％O2+5％CO2混合氣體持續(xù)飽和的Krebs液的麥?zhǔn)喜鄣撞?另一端連接張力換能器,用超級(jí)恒溫槽水浴循環(huán)維持在34.5-35.5℃左右,調(diào)整前負(fù)荷,平衡15分鐘。用10-8mol/L的異丙腎上腺素

12、激活標(biāo)本,連續(xù)三次,給予新冠心蘇合活血方藥液,給藥方法同前,采用MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析儀,系統(tǒng)采集不同濃度新冠心蘇合活血方對(duì)胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈張力變化數(shù)據(jù),并分析其作用。
　　 結(jié)果:新冠心蘇合活血方對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈收縮力隨著給藥濃度的增加其作用增強(qiáng)。當(dāng)濃度100mg/l時(shí)其作用不明顯(P＞0.05);濃度在150mg/l、200mg/l、250mg/l時(shí),其該藥在降低大鼠離體心肌收縮力,減慢心搏頻