丙酮酸乙酯對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用及其機制研究.pdf

1、研究目的：探討丙酮酸乙酯對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)的作用及其部分細胞分子機制。 研究方法：(1)動物實驗部分：雄性SD大鼠48只，隨機分為正常組16只(A組)、模型組16只(B組)、丙酮酸乙酯組16只(C組)。B組、C組采用完全佛氏佐劑造模。C組造模后采用丙酮酸乙酯50mg/kg劑量，每天腹腔注射2次，連續(xù)37天，干預(yù)過程中連續(xù)對大鼠的一般情況及關(guān)節(jié)炎癥程度進行目測評分。肉眼觀察足腫脹并進行關(guān)節(jié)炎指數(shù)(arthritis ind

2、ex，AI)評分；組織病理學(xué)對滑膜炎、放射學(xué)和組織病理學(xué)對骨質(zhì)破壞進行評分，放射學(xué)評分采用Larsen評分標準。第37天處死所有大鼠，心臟采血，ELISA法檢測血清TNF-α和IL-1β濃度。(2)細胞實驗部分：培養(yǎng)原代RA患者成纖維樣滑膜細胞(fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS)。①分別采用5 Mmol/l、10Mmol/l和20Mmol/lEP干預(yù)FLS，ELISA檢測上清。②分別采用5Mmol/l、1

3、0Mmol/l和20Mmol/l EP干預(yù)FLS，之后給予TNF-α刺激，ELISA檢測上清。 結(jié)果：①丙酮酸乙酯對佐劑性關(guān)節(jié)炎的保護作用：從大鼠出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹直至實驗結(jié)束，丙酮酸乙酯組關(guān)節(jié)腫脹均比模型組輕，造模第28天開始，關(guān)節(jié)炎指數(shù)均低于模型組(P<0.05)；，丙酮酸乙酯組放射學(xué)Larsen評分與模型組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義；丙酮酸乙酯組滑膜炎性細胞浸潤較輕，關(guān)節(jié)破壞較輕，滑膜炎評分和關(guān)節(jié)破壞評分低于模型組(P<0.05)。

4、 ②丙酮酸乙酯組大鼠血清TNF-α和IL-1β水平較模型組明顯降低(P<0.05)，較正常組升高(P<0.05)。 ③丙酮酸乙酯對滑膜細胞炎癥反應(yīng)的影響：EP單獨刺激下，各濃度EP干預(yù)組IL-6濃度與空白對照組無明顯差異。而在TNF-α刺激下，5 Mmol/l、10Mmol/l和20Mmol/l EP能明顯抑制TNF-α所致成纖維樣滑膜細胞IL-6的分泌，并且EP對TNF-α所致IL-6的分泌的抑制作用具有劑量依賴性，其最