局部黏著斑激酶抑制劑的設(shè)計、合成及藥理活性初篩.pdf

1、隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,腫瘤細胞的很多特異性信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路已經(jīng)被人們所熟知,針對這些特異性信號通路中的某些重要靶點來進行藥物設(shè)計,已成為研究抗腫瘤藥的一個重要方法,且由此得出的藥物具有較高的選擇性和較低的毒副作用。腫瘤細胞的生長速度快和易于擴散,是腫瘤難于治愈的主要原因。局部黏著斑激酶(FAK)是一種非受體的酪氨酸激酶,其調(diào)節(jié)多種細胞作用,過量表達的FAK已經(jīng)在大量的人類癌細胞中被檢測出,如乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、卵巢癌等。

2、整合素和生長因子受體的激活,引起FAK在Y397位點的自動磷酸化,提供了包含有SH2區(qū)域或磷酸酪氨酸連接位點的蛋白質(zhì)合適的結(jié)合位點,進而激活大量的下游信號通路,調(diào)節(jié)細胞的移動、增殖、存活等多方面的活動,因此設(shè)計合成FAK的抑制劑便可以選擇性的阻斷癌細胞的移動、增殖、存活,對于癌癥的治療具有重要意義?；谀壳斑M入臨床階段的藥物較少,本課題希望通過計算機輔助藥物設(shè)計軟件,在前人工作的基礎(chǔ)上,設(shè)計合成出一些高活性高選擇性的化合物,并對其進行藥

3、理活性的初篩,為新型抗癌藥的設(shè)計和結(jié)構(gòu)優(yōu)化提供實驗和理論支持。
　　本課題研究的主要內(nèi)容及成果如下:
　　1、FAK抑制劑的藥效團模型的構(gòu)建和目標化合物的設(shè)計
　　選取文獻報道的具有一定活性的化合物結(jié)構(gòu)及IC50值,利用Catalyst軟件構(gòu)建出FAK抑制劑的藥效團模型并進行驗證。結(jié)合已知化合物的結(jié)構(gòu)特征和上述藥效團模型,以間氨基苯基哌嗪為母體設(shè)計5個新型的FAK抑制劑,同時利用構(gòu)建出的藥效團模型,進行活性的初步預(yù)測,

4、并利用Pallas3.3.2.6軟件對目標化合物進行了類藥性分析。
　　2、FAK抑制劑的合成及結(jié)構(gòu)鑒定
　　以間溴苯胺為原料,經(jīng)由碘化亞銅催化的C-N偶合反應(yīng)、甲酰化、酯化等一系列的反應(yīng)最終得到目標化合物,利用UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等方法對目標化合物的結(jié)構(gòu)進行鑒定,利用HPLC對目標化合物進行純度分析。
　　3、藥理活性初篩及藥效團模型的驗證
　　本文選取了FAK高度表達的兩種人類癌細胞系:M

5、CF-7,Caco-2,利用MTT檢測法體外檢測目標化合物對腫瘤細胞的抑制率。實驗結(jié)果表明目標化合物A-D對MCF-7,Caco-2都具有很好的抑制作用,而E的作用規(guī)律性較差。其中D的作用較好,在較低濃度時(4μmol/L)也有一定的抑制作用,特別是對Caco-2有較好的抑制作用,IC50為15.47μmol/L,具有進一步開發(fā)的潛力。將藥理活性的實驗值與藥效團模型的預(yù)測值進行對比,可以發(fā)現(xiàn)預(yù)測活性與實際活性具有一定的一致性,表明FAK