The Effects of Rhubarb and Paeonia on IL-6 expression in liver failure Rat.pdf

1、目的：通過實驗研究，探討大黃、赤芍對90％肝切除后肝衰竭大鼠肝再生的影響及作用機(jī)制。
　　方法：采用90%肝葉切除術(shù)構(gòu)建大鼠肝衰竭肝再生模型，SPF級Wistar大鼠300只，隨機(jī)分為6組：假手術(shù)組50只、模型對照組50只、大黃注射液組50只、赤芍注射液組50只、大黃赤芍聯(lián)合組50只、促肝細(xì)胞生長素組50只。腹腔注射給藥，分別在成模后（3h、6h、12h、24h、48h、72h）6個不同的時間點，每組各取6只大鼠，經(jīng)1%戊巴比妥鈉

2、麻醉，腹主動脈采血，離心收集血清，采用自動生化儀檢測血清AST、ALT、TBiL含量，測定PT、PTA值；ELSA法檢測血清IL-6水平；腹主靜脈采血后，剖取肝臟，PBS洗凈肝組織，濾紙吸干，電子天平稱重，計算肝重指數(shù)；分別予10%甲醛液固定，采用HE染色法觀察肝細(xì)胞有絲分裂指數(shù)；免疫組化法檢測肝組織中PCNA表達(dá)；剩余大鼠用于96h存活率觀察。
　　結(jié)果：實驗各組大鼠血清ALT、AST、TBIL含量測定結(jié)果：模型組與假手術(shù)組比較

3、，模型組ALT和AST、TBIL明顯升高（P＜0.01），表明肝葉切除可使殘存肝細(xì)胞嚴(yán)重受損。中藥干預(yù)組的ALT、AST、TBIL與促肝細(xì)胞生長素組比較：大黃注射液組、赤芍注射液組、大黃赤芍聯(lián)合組及促肝細(xì)胞生長素組的ALT、AST和TBIL均明顯降低（P＜0.05），而以大黃赤芍聯(lián)合組與促肝細(xì)胞生長素組下降更顯著，提示大黃赤芍聯(lián)合組能顯著改善肝衰竭大鼠肝功能。
　　實驗各組大鼠PT、PTA測定結(jié)果：模型組與假手術(shù)組比較，模型組PT

4、顯著升高，PTA下降，表明肝葉切除術(shù)可致殘存肝組織凝血機(jī)制嚴(yán)重障礙。中藥干預(yù)組凝血酶原時間（PT）與促肝細(xì)胞生長素組比較：24-48h大黃注射液組、赤芍注射液組、大黃赤芍聯(lián)合組及促肝細(xì)胞生長素組均有下降。在改善PTA方面：大黃注射液組、赤芍注射液組、大黃赤芍聯(lián)合組、促肝細(xì)胞生長素組均有上升，但以大黃赤芍聯(lián)合組與促肝細(xì)胞生長素組效果明顯，二者之間比較無統(tǒng)計學(xué)意義。說明大黃赤芍聯(lián)合用藥與促肝細(xì)胞生長素均能顯著改善肝衰竭大鼠凝血功能。

5、　　與假手術(shù)組比較，成模后模型組、大黃注射液組、赤芍注射液組、大黃赤芍聯(lián)合用藥組和促肝細(xì)胞生長素組血清IL-6水平都顯著增高（P＜0.01）;中藥干預(yù)組與促肝細(xì)胞生長素組比較，以大黃赤芍聯(lián)合組的升高最為明顯（P＜0.05），提示大黃赤芍聯(lián)合用藥可以明顯促進(jìn)血清中IL-6的水平上升。
　　與模型組肝重指數(shù)比較：藥物干預(yù)組與假手術(shù)組高于模型組，差異有顯著性意義（P＜0.01）。藥物干預(yù)組組內(nèi)比較：術(shù)后24h的肝重指數(shù)大黃赤芍聯(lián)合組、促

6、肝細(xì)胞生長素組明顯高于大黃注射液組、赤芍注射液組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），大黃赤芍聯(lián)合組與促肝細(xì)胞生長素組比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。說明大黃赤芍聯(lián)合用藥組促進(jìn)肝細(xì)胞再生的作用，明顯優(yōu)于單味藥組，與促肝細(xì)胞生長素作用相當(dāng)。
　　術(shù)后24h的肝細(xì)胞核分裂指數(shù)，藥物干預(yù)組組有絲分裂指（核分裂相／1000個肝細(xì)胞）明顯高于模型組（P＜0.05），大黃赤芍聯(lián)合組有絲分裂指數(shù)明顯高于其它藥物干預(yù)組，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.

7、05）。
　　在成模后24h，模型組、藥物干預(yù)組與假手術(shù)組比較，大鼠肝組織中增殖細(xì)胞核抗原水平顯著增高，有明顯差異（P＜0.05）;組內(nèi)比較，在成模后24h大黃注射液組、赤芍注射液組、大黃赤芍聯(lián)合用藥組、促肝細(xì)胞生長素組大鼠肝組織中增殖細(xì)胞核抗原水平明顯增高（P＜0.05），其中以大黃赤芍聯(lián)合用藥組和促肝細(xì)胞生長素組最為明顯。
　　成模后96h各組之間的存活率比較，以促肝細(xì)胞生長素組與大黃赤芍聯(lián)合組療效最佳，大黃注射液組、赤

8、芍注射液組療效其次，最差為模型組。通過本研究可以認(rèn)為大黃、赤芍以及促進(jìn)肝細(xì)胞生長素均能提高肝衰竭大鼠的存活率，且以大黃赤芍聯(lián)合用藥療效最為顯著。
　　結(jié)論：（1）大黃、赤芍能改善肝葉切除術(shù)后肝衰竭大鼠的肝功能、凝血功能，提高大鼠生存率。（2）大黃、赤芍具有增高肝葉切除術(shù)后肝衰竭大鼠血清IL-6水平的作用。（3）從肝重指數(shù)、肝細(xì)胞核分裂指數(shù)、增殖細(xì)胞核抗原水平的表達(dá)等實驗數(shù)據(jù)，推斷大黃、赤芍具有促進(jìn)肝衰竭大鼠肝細(xì)胞再生的作用。（4）