針對人類軟骨糖蛋白-39的siRNA表達載體的構(gòu)建及其對胃癌細胞株SGC-7901凋亡的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文針對人類軟骨糖蛋白39的siRNA表達載體的構(gòu)建及其對胃癌細胞株SGC7901凋亡的影響姓名：龐春艷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳衛(wèi)車團結(jié)20070601蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文ConstructionofsiRNAagainsthumancartilageglycoprotein一39(HCGP39)anditseffeetiononapoptosisinSGC7901cellsABSTRAC

2、TobiectⅣ璐：ToconstmctvectorsexpressingsiRNAagainsthumancartilagegiyceprotein39(HCGP39，YKI_40)andtocheckitsfunctioninSGC7901cellsMethods：Oligosof74basepairsforsmallinterferingRNAtargetingYKL40werechemicallysynthesizedanddi

3、gestedbyBamHIandHindlHThedigesteddoublestrandsoligoswereinsertedintothedownstreamofHIpromoteroflinearizedpSUPERbasicvectorAfterthesiRNAconstructswefeconfirmedbypolymerascchainreactionandrestrictiveenzymedigestion，thereco

4、mbinantplasmidwastransfectedintoSGC一7901，agastriccancercelllineMorphologicalchangesofthetumorcellswcroexaminedbyinvertmicroscopeTheproliferationofthecellswasdeterminedbyMTTmethodThelevelchangeofYKL40mRNAofinSGC7901cellsw

5、asdetectedbyRTPCRassayandthedivisionofcellcyclewasdetectedbyFCMResults：ThedataofpolymerasechainreactionandrestrictiveenzymedigestionshowedthattheexpressedsiRNAcouldbeconstructedInductionofYKL40siRNAwasabletoinduceapoptos

6、isandinhibitproliferationinSGC7901afterradiationofXrayMeanwhilethedataofRTPCRshowedevidentexpressioninductionofYKL40mRNAinSGC一7901cellsduringtheapoptosisinducfionofYKL40siRNAThepercentageofpre—GIandGIincreasedwhentheperc

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