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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究羅格列酮對(duì)體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞株SGC-7901增殖和凋亡的影響,并初步探討其作用機(jī)制。
方法:不同濃度羅格列酮(12.5、25、50、100μmol/L)作用于對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的胃癌細(xì)胞SGC-7901,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法觀察羅格列酮對(duì)SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)對(duì)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響:RT-PCR方法檢測(cè)Bcl-2、Caspase-3及VEGF
2、mRNA的表達(dá)水平:免疫組化(SP)法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)bcl-2、caspase-3及VEGF蛋白表達(dá)變化。
結(jié)果:(1)MTT比色法顯示不同濃度的羅格列酮可抑制SGC-7901細(xì)胞增殖,抑制作用呈時(shí)間和劑量依賴性,試驗(yàn)組與對(duì)照組及各試驗(yàn)組之間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞SGC-7901經(jīng)羅格列酮作用48小時(shí)后可見細(xì)胞周期有明顯變化,G0/G1期細(xì)胞比例上升,S期細(xì)胞比例下降,呈濃度依賴性(P
3、<0.05),細(xì)胞凋亡率與羅格列酮濃度呈正相關(guān)。(3)RT-PCR法和免疫組化(SP)法顯示,SG-C-7901細(xì)胞Caspase-3mRNA和蛋白隨羅格列酮濃度增加而表達(dá)增加,Bcl-2、VEGFmRNA和蛋白隨藥物濃度增加表達(dá)下降(P<0.05)。
結(jié)論:(1)羅格列酮可以抑制體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。(2)羅格列酮對(duì)SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡作用可能與上調(diào)Caspase-3基
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