B7-H4在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎小鼠中的表達(dá)及B7-H4-Fc融合蛋白的治療作用.pdf

1、目的:
　　本實(shí)驗(yàn)擬建立小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎(EAM)模型，通過對小鼠血液、脾淋巴細(xì)胞、心肌等組織的檢測，研究B7-H4在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎小鼠病程中表達(dá)情況，并觀察B7-H4-Fc融合蛋白對實(shí)驗(yàn)性自身免疫性心肌炎的治療作用，以期為心肌炎發(fā)病機(jī)制的研究提供一種新的研究方向，并為臨床治療心肌炎提供一種新的治療措施。
　　方法:
　　將120只BALB/c小鼠隨機(jī)分為對照組（24只），實(shí)驗(yàn)組（48只）與治療組（4

2、8只）。給實(shí)驗(yàn)組與治療組小鼠注射豬心肌肌凝蛋白（200ug/只），并于實(shí)驗(yàn)第一天開始給予治療組小鼠B7-H4-Fc融合蛋白(3.75mg/kg)，每周一次;對照組給予同體積不含肌凝蛋白的完全弗氏佐劑及PBS。在實(shí)驗(yàn)的第14、21、30、45天分批處死小鼠，血液離心后收集血清進(jìn)行ELISA檢測抗體滴度，無菌取脾臟進(jìn)行淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，一部分心肌用甲醛固定，脫水制蠟塊后切片，進(jìn)行HE染色及免疫組織化學(xué)染色，另一部分凍存于-80℃冰箱中，之后

3、進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR（real-timePCR）。
　　結(jié)果:
　　實(shí)驗(yàn)組小鼠心肌HE染色結(jié)果顯示，心肌炎癥改變在第21、30天時最嚴(yán)重，之后逐漸降低;ELISA檢測抗體滴度、淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)與real-timePCR的結(jié)果與心肌炎癥情況類似，在實(shí)驗(yàn)期間隨炎癥情況變化，但較對照組均增高;免疫組化結(jié)果顯示B7-H4蛋白在心肌炎的心肌血管內(nèi)皮恒定表達(dá)，不隨心肌炎病情變化而變化。治療組小鼠心肌HE染色結(jié)果顯示，心肌炎癥較實(shí)驗(yàn)組減