B7-H4在上皮性卵巢腫瘤組織中的表達及患者血清B7-H4、HE4、CA125水平對上皮性卵巢癌的診斷價值.pdf

1、目的：卵巢癌是婦科死亡率最高的惡性腫瘤，其發(fā)病隱匿，進展迅速，70％～80％的卵巢癌病人發(fā)現(xiàn)時已為晚期，其5年生存率僅為20％～30％，主要原因是早期卵巢癌沒有癥狀，病人難以及時就診。因此上皮性卵巢癌的早期診斷成為亟待解決的課題。本研究通過檢測協(xié)同共刺激因子4（B7-H4，又稱B7s、B7x）在正常卵巢、上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤、卵巢癌組織及血清中B7-H4、人附睪蛋白4（human epididymis protein4，H

2、E4）的表達水平，探討B(tài)7-H4、HE4與卵巢癌之間的相關(guān)性，并通過與CA125比較，探討作為腫瘤標記物與CA125聯(lián)合檢測，用于卵巢癌早期診斷、監(jiān)測療效的價值。
　　 方法：
　　 1.免疫組織化學法檢測正常卵巢及上皮性卵巢腫瘤組織中B7-H4蛋白的表達水平，其中正常卵巢11例、良性卵巢腫瘤20例、交界性卵巢腫瘤10例、卵巢癌30例（漿液性囊腺癌25例，粘液性囊腺癌5例）。比較4種組織中B7-H4陽性表達情況，以及B7

3、-H4在卵巢癌組織中的陽性表達率與不同臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　 2.酶聯(lián)免疫吸附（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）雙抗體夾心法檢測血清中B7-H4、HE4的濃度，其中健康婦女11例、良性卵巢腫瘤20例、交界性卵巢腫瘤7例、卵巢癌術(shù)前、術(shù)后各25例，血清CA125濃度由本院實驗室采用電化學發(fā)光法常規(guī)測得。比較4組血清中B7-H4、HE4表達水平。分析卵巢癌病人術(shù)前血清B7-H4

4、、HE4濃度值與與不同臨床病理特征的關(guān)系。比較卵巢癌病人術(shù)前術(shù)后血清B7-H4、HE4表達水平的變化。分析卵巢癌病人術(shù)前血清B7-H4濃度值與組織中表達強度之間的相關(guān)性。
　　 3.以健康婦女+良性腫瘤組作參考人群，制作ROC曲線獲得界點值，計算血清B7-H4、HE4診斷卵巢癌的敏感度和特異度。比較B7-H4、HE4單獨或聯(lián)合CA125檢測卵巢癌的價值。比較血清HE4在不同界值點時對上皮性卵巢癌的診斷能力。
　　 4.應

5、用SAS統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料為偏態(tài)分布，用中位數(shù)表示，成組多樣本比較采用Kruskal-wallis秩和檢驗，組間兩兩比較采用Bonferronit t檢驗，配對資料采用Wilcoxon符號秩和檢驗。計數(shù)資料采用x2檢驗，不同組織學類型、臨床分期、病理分級及陽性表達率的比較采用x2檢驗和Fisher確切概率法。卵巢癌血清B7-H4濃度值與組織中B7-H4表達強度之間的相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析，P<0.05為差異

6、有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.B7-H4在正常卵巢、上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌組織中的表達
　　 B7-H4主要表達于卵巢上皮組織細胞的細胞漿、細胞膜，而細胞核不著色。B7-H4在4組中陽性表達率分別為9.1％（1/11）、20％（4/20）、30％（3/10）、83.3％（25/30）。卵巢癌組陽性表達率顯著高于前三組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.0071），其余組間差異無統(tǒng)計學意義（P

7、>0.0071）。
　　 2.B7-H4在卵巢癌組織中的表達與不同臨床病理特征之間的關(guān)系
　　 B7-H4在卵巢漿液性囊腺癌中的陽性表達率為92％（23/25），明顯高于黏液性囊腺癌40％（2/5），差異有統(tǒng)計學意義（P=0.0219<0.05）；早期卵巢癌（Ⅰ/Ⅱ期）組織中陽性表達率57.1％（4/7），明顯低于晚期卵巢癌（Ⅲ/Ⅳ期）組織中陽性表達率95.7％（22/23）（P=0.0307<0.05）；高分化者陽性表

8、達率為62.5％（5/8），明顯低于中、低分化者陽性表達率95.5％（21/22）（P=0.0475<0.05）。
　　 3.B7-H4、HE4在健康婦女、上皮性良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤及卵巢癌病人血清中的表達水平
　　 B7-H4、HE4卵巢癌組表達水平均高于前三組，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05），其余各組間表達水平無統(tǒng)計學差異（均P>0.05）。B7-H4、HE4術(shù)后3天表達水平較術(shù)前均顯著降低，差異有統(tǒng)計學

9、意義（P<0.0001）。
　　 4.卵巢癌組B7-H4、HE4血清表達水平與I臨床病理特征之間的關(guān)系
　　 B7-H4與分期、分級、類型相關(guān)，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05），與年齡、CA125不相關(guān)，差異無統(tǒng)計學意義（均P>0.05），卵巢癌組術(shù)前血清B7-H4濃度值與組織中B7-H4的表達強度成顯著正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）；HE4表達水平與類型、年齡及CA125相關(guān)，差異有統(tǒng)計學意義（均P<0.05），而與分期

10、、分級不相關(guān)，差異無統(tǒng)計學意義（均P>0.05）。
　　 5.以健康婦女+良性腫瘤組作參考人群，B7-H4、HE4濃度分別在0.78ng/ml、107.15pmol/L，時，（敏感性+特異性）-1的差值最大，即為最佳界值點。B7-H4檢測卵巢癌的ROC-AUC為0.865，敏感度為84％，特異度為78.9％；HE4檢測卵巢癌的ROC-AUC為0.960，敏感度為88％，特異度為92.1％。
　　 6.CA125的界點值為

11、35KU/L、B7-H4的界點值為0.78ng/ml，HE4的界點值為107.15pmol/L（ROC曲線所得）或150pmol/L，（試劑盒提供）時：B7-H4、HE4、CA125單獨對卵巢癌檢測的敏感度無差異（P>0.05）；CA125與B7-H4聯(lián)合檢測、CA125與HE4聯(lián)合檢測，B7-H4、HE4、CA125三者聯(lián)合檢測敏感度均高于CA125單獨檢測，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。在5例早期（Ⅰ、Ⅱ期）卵巢癌的診斷中HE4

12、的敏感度為100％，B7-H4為80％，CA125為60％。
　　 7.當血清HE4界值點分別為107.15pmol/L、150pmol/L時，其敏感度、特異度、準確度、陽性預測值及陰性預測值比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.B7-H4蛋白在卵巢癌組織中高表達，其表達水平與卵巢癌臨床病理分期、分級、類型相關(guān)。血清B7-H4水平能代表組織中B7-H4表達情況，B7-H4蛋白可能參與

13、了腫瘤的發(fā)生發(fā)展。
　　 2.卵巢癌病人術(shù)前血清B7-H4、HE4水平升高，有望成為篩查卵巢癌的標記物。B7-H4血清表達水平與卵巢癌臨床病理不良分期、分級、類型正相關(guān)，與年齡、CA125不相關(guān)。HE4表達水平與類型、年齡、CA125正相關(guān)，與分期、分級不相關(guān)。HE4、B7-H4可輔助CA125對卵巢癌的診斷。
　　 3.B7-H4、HE4、CA125對卵巢癌單項檢測的敏感度無差異；CA125與B7-H4聯(lián)合檢測、CA1