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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究槲皮素對(duì)H2O2所致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304氧化性損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。
方法:采用體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304,用MTT法篩選H2O2致細(xì)胞損傷的最佳濃度,在模型的基礎(chǔ)上,流式細(xì)胞儀測(cè)定內(nèi)皮細(xì)胞壞死率和平均熒光強(qiáng)度的變化;ELISA法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液TM含量;熒光分光光度法測(cè)定內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH的含量;RT-PCR技術(shù)測(cè)定PAI-1 mRNA的相對(duì)表達(dá);Western Blot法測(cè)
2、定內(nèi)皮細(xì)胞caspase-3的活性;共聚焦激光掃描顯微鏡測(cè)定細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的變化。
結(jié)果:
1.槲皮素可以使培養(yǎng)液中TM和LDH的含量減少,降低內(nèi)皮細(xì)胞壞死率和平均熒光強(qiáng)度。
2.槲皮素可以并能下調(diào)PAI-lmRNA的表達(dá)。
3.槲皮素可以降低caspase-3活性,減少細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的增加幅度。
結(jié)論:
1.槲皮素能減少H2O2損傷后內(nèi)皮細(xì)
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