番茄microRNA定量檢測及其與病毒侵染的關(guān)系.pdf

1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文番茄micrNA定量檢測及其與病毒侵染的關(guān)系姓名：王鍇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳集雙20081201浙江理T大學(xué)碩學(xué)位論文RTPCR方法對miRNA的檢測分析。建立了在植物中研究roARNA與其靶基因表達與植物感病表型相互關(guān)系的試驗體系，為以后的研究提供參考。黃瓜花葉病毒(Cucumbermosaicvirus，CMv)是一種較為常見的植物病毒，番茄不孕病毒(Tomatoasperm

2、yvirusTAV)和CMV同屬于雀麥花葉病毒科(Bromorididae)科，它們從病毒粒子外形到基因組結(jié)果諸多方面都很相似。它們都編碼沉默抑制子2b蛋白對抗植物的sigNA調(diào)節(jié)途徑。但是它們在侵染的寄主上表現(xiàn)的癥狀有明顯差異，CMVFnyA2b為缺失2b基因的CMVFny株系，已不具有表達沉默抑制子2b的能力。不同病毒沉默抑制子通常會特異的對沉默路徑中的不同組分產(chǎn)生作用。寄主被這3種病毒侵染后，將會是小RNA調(diào)控途徑出現(xiàn)不同的變化。

3、通過對rniRNA及其靶基因的檢測將使有助于了解病毒侵染使寄主的生理特征發(fā)生怎樣的變化，揭示癥狀產(chǎn)生的根本原因，搞清致病機理。經(jīng)過試驗發(fā)現(xiàn)在侵染病毒1015天的階段，植物體的miRNA出現(xiàn)了整個檢測周期最劇烈的變化。而這個階段也是病毒積累量最大，植物癥狀最明顯的階段。在CMVFny株系，TAVBJ作用下寄主葉組織中絕大部分靶基因的表達量都出現(xiàn)一定程度的升高，其中前者強于后者，表明可能兩者沉默抑制子的作用不同，而CMVFnyA2b靶基因變