不同品種懷地黃以糖類成分為指標(biāo)的質(zhì)量控制評價標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、　　目的：通過對懷地黃藥材進行系統(tǒng)研究,制定懷地黃中糖類指標(biāo)性成分多糖、小分子總糖、葡萄糖、蔗糖、棉籽糖、水蘇糖及藥材中水分的測定方法,從而更有效的保證懷地黃藥材的質(zhì)量,為懷地黃藥材的種植提供科學(xué)依據(jù)；初步建立懷地黃藥材低聚糖部位的HPLC指紋圖譜,為道地產(chǎn)區(qū)懷地黃藥材以糖類成分為指標(biāo)的內(nèi)在質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：本實驗共采集 13 批鮮地黃樣本,全部產(chǎn)自道地產(chǎn)區(qū),生地黃樣本自行加工。采用分光光度法分別對鮮地黃和生地

2、黃中的多糖及小分子總糖進行含量測定；采用RP-RID-HPLC法對單糖、低聚糖成分進行含量測定；分別建立了13批懷地黃樣本鮮品及生品的HPLC指紋圖譜,以相對保留時間和相對峰面積為指標(biāo)進行方法學(xué)考察,采用 CHROMAP1.5 指紋圖譜處理軟件對其進行聚類分析及相似度分析,并對鮮品及生品的HPLC圖譜進行比較。
　　結(jié)果：通過研究確定了懷地黃中糖類指標(biāo)性成分的含量測定方法：
　　( 1 )多糖及小分子總糖采用紫外分光

3、光度法進行測定,兩種成分在 20.02~70.07μg(R2=0.9995)范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。其平均回收率為 96.94%,RSD為3.32%；(2)同時采用RP-HPLC-RID法對懷地黃中低聚糖成分進行含量測定,色譜條件為：色譜柱： Agilent Zorbax NH2 (4.6×250 mm,5μm)；流動相：乙腈-水(70：30)等度進行洗脫；柱溫：30 ℃；流速：1 mL﹒min-1。RID 色譜條件：內(nèi)部溫度30 ℃；

4、理論塔板數(shù)按蔗糖計算不低于2200。鮮地黃中葡萄糖、蔗糖、棉籽糖、水蘇糖分別在1.50~15.00μg(R2=0.9999)、25.20~92.40μg(R2=0.9999)、1.50~15.00μg(R2=0.9999)、110.30~523.93μg(R2=0.9998)范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。其平均加樣回收率分別為：96.41%、98.40%、97.34%、99.10%, RSD分別為 1.27%、1.63%、1.37%、1.08

5、%；生地黃中葡萄糖、蔗糖、棉籽糖、水蘇糖分別在1.50~15.00μg(r2=0.9999)、25.20~92.40μg(R2=0.9999)、8.30~49.80μg (R2=0.9995)、41.35~144.73μg(R2=0.9999)范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。其平均加樣回收率分別為96.58%、97.49%、99.38%、100.13%,RSD分別為1.38%、1.13%、1.51%、1.74%。結(jié)果表明,以上所建立的測定方法簡

6、便易行,重復(fù)性良好；(3)初步建立了懷地黃鮮品及生品的HPLC指紋圖譜,方法考察各項指標(biāo)均符合要求,鮮地黃獲得了10個共有峰,指認了其中5個色譜峰,生地黃獲得了12個共有峰,指認了其中6個共有峰,分別建立相關(guān)共有模式,各相關(guān)系數(shù)均在0.9以上,進而初步建立了懷地黃HPLC指紋圖譜及其質(zhì)量評價方法。
　　結(jié)論：通過對懷地黃藥材的系統(tǒng)研究,建立了地黃藥材多種糖類指標(biāo)性成分質(zhì)控方法；對不同產(chǎn)地及不同品種懷地黃中指標(biāo)性成分進行了含量測