烏司他丁對(duì)毛細(xì)血管滲漏綜合征毛細(xì)血管通透性影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 通過(guò)制備大鼠毛細(xì)血管滲漏綜合征模型，測(cè)定大鼠血清VEGF、IL-2的濃度、觀(guān)察毛細(xì)血管滲漏綜合征大鼠組織形態(tài)學(xué)及肺、腎組織毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB的表達(dá)，探討烏司他丁對(duì)毛細(xì)血管滲漏綜合征大鼠模型毛細(xì)血管通透性影響的可能機(jī)制。
　　 方法：1、成年健康SD大鼠，雄性，SPF級(jí)，20只，隨機(jī)分為正常組（Normal 組）和模型組（Model 組），每組各10只。采用盲腸結(jié)扎穿刺腹膜炎（CLP）模型，制備大鼠毛細(xì)血管滲漏綜

2、合征模型。開(kāi)腹后肉眼觀(guān)察大鼠腹腔大體情況，伊文思蘭法測(cè)血漿蛋白跨毛細(xì)血管轉(zhuǎn)移率評(píng)價(jià)毛細(xì)血管通透性，干濕比重法測(cè)組織含水量、伊文思蘭法測(cè)組織毛細(xì)血管通透性，光鏡下觀(guān)察毛細(xì)血管滲漏綜合征大鼠臟器形態(tài)學(xué)改變。
　　 2、成年健康SD大鼠，雄性，SPF級(jí)，80只，隨機(jī)分為正常組（Normal 組）、烏司他丁組（UTI組）和模型組（Model 組）；其中正常組大鼠20只，烏司他丁組及模型組各30只。造模方法同上述，造模后觀(guān)察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12

3、小時(shí)，處死前頸靜脈取血2ml，3000rpm，10min，離心取上清ELISA法測(cè)血清VEGF、IL-2；處死動(dòng)物后取肺、肝、腎、腦組織分別行病理學(xué)檢查、干濕比重法測(cè)含水量、伊文思蘭法測(cè)毛細(xì)血管通透性；免疫組織化學(xué)法觀(guān)察肺、腎組織毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB表達(dá)，并比較不同組肺、腎組織毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB灰度值。
　　 結(jié)果：1、①造模后12小時(shí)，模型組開(kāi)腹后可見(jiàn)大量血性滲液，腸管表面可見(jiàn)大量膿苔。②模型組血漿蛋白跨血管轉(zhuǎn)移

4、率（TER值）明顯高于正常組，差異有顯著性（P＜0.05）；③肺、肝、腎、腦各組織毛細(xì)血管通透性變化：肺、肝、腎組織毛細(xì)血管通透性均有不同程度升高，與正常組比較，模型組肺、肝、腎組織毛細(xì)血管通透性有明顯升高（P＜0.05），腦組織毛細(xì)血管通透性與正常組比較無(wú)明顯差異（P＞0.05）④肺、肝、腎、腦各組織干濕比變化：模型組肺、肝、腎、腦各組織干濕比均高于正常組，差異有顯著性（P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01，P＜0.05）；⑤模型

5、組肺、肝、腎、腦組織常規(guī)HE染色可見(jiàn)明顯病理學(xué)改變。
　　 2、①腹腔大體情況：模型組12h后腹腔可見(jiàn)大量血性滲液，腸管表面可見(jiàn)大量膿苔。烏司他丁組大鼠腹腔的滲出較少且紅色較淺。腸管表面有少量膿苔。②肺、肝、腎、腦各組織毛細(xì)血管通透性變化：模型組肺、肝、腎組織毛細(xì)血管通透性明顯高于正常組和烏司他丁組（P＜0.01），烏司他丁組肺、肝、腎組織毛細(xì)血管通透性仍高于正常組，差異有有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。模型組、烏司他丁組和正常組

6、組間腦組織毛細(xì)血管通透性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；③肺、肝、腎、腦各組織干濕比變化：烏司他丁組肺、肝、腎、腦干濕比較模型組明顯減輕（p＜0.05）；但烏司他丁組肺、肝、腎、腦干濕比高于正常組（P＜0.05）；④模型組血清VEGF、IL-2較正常組和烏司他丁組明顯升高（P＜0.05），烏司他丁組血清VEGF、IL-2高于正常組（P＜0.05）。⑤模型組肺、肝、腎、腦組織常規(guī)HE染色病理學(xué)改變較烏司他丁組和正常組嚴(yán)重，烏司他丁組病理學(xué)改

7、變接近正常組。⑥模型組肺、腎組織毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性，灰度值較正常組和烏司他丁組明顯降低（p＜0.05），烏司他丁組灰度值較正常組低（p＜0.05）。⑦模型組肺、肝、腎、腦組織電鏡超微結(jié)構(gòu)改變較烏司他丁組和正常組嚴(yán)重，烏司他丁組病理學(xué)改變接近正常組。
　　 結(jié)論：1.CLP可致大鼠CLS，可用于大鼠CLS模型建立。
　　 2.UTI可部分改善CLS毛細(xì)血管通透性，在一定程度上可減輕組織水腫。