表達(dá)鼠CXCL13重組狂犬病病毒的構(gòu)建及免疫原的研究.pdf

1、狂犬病(Rabies)是一種嚴(yán)重危害人和動(dòng)物的烈性傳染病，分布在全世界約150個(gè)國(guó)家。到目前為止，接種狂犬病毒疫苗仍是該病最簡(jiǎn)單有效的預(yù)防、控制方法，因此，開發(fā)安全、高效低廉的新型狂犬病疫苗仍具有重要意義。
　　趨化因子CXCL13可以通過與CXCR5受體結(jié)合，趨化B淋巴細(xì)胞和濾泡輔助T細(xì)胞(T follicular helper cell，TFH)細(xì)胞進(jìn)入二級(jí)淋巴濾泡，促使生發(fā)中心(Germinal center, GC)和記憶

2、B細(xì)胞和高親和力抗體的產(chǎn)生。鑒于CXCL13在體液免疫過程中的重要作用，我們構(gòu)建了表達(dá)鼠CXCL13蛋白的重組狂犬病病毒LBNSE-CXCL13，通過小鼠感染狂犬病毒模型來探究CXCL13在狂犬病毒感染過程中作用和機(jī)制。具體研究結(jié)果如下:
　　1.重組狂犬病病毒LBNSE-CXCL13在BSR和NA細(xì)胞上生長(zhǎng)特性均與親本毒株LBNSE相似，無顯著差異;
　　2.腦內(nèi)接種4×106 FFU LBNSE-CXCL13病毒，小鼠體

3、重變化率與LBNSE-GM-CSF組相似，與LBNSE組無顯著差異，實(shí)驗(yàn)過程中小鼠無明顯臨床癥狀和死亡現(xiàn)象;
　　3.肌肉免疫1×106 FFU狂犬病病毒，LBNSE-CXCL13組小鼠2-6周抗體平均水平明顯較LBNSE-GM-CSF和LBNSE組高，且三組第9周抗體水平均高于0.5IU/ml;
　　4.與LBNSE相比，LBNSE-CXCL13對(duì)小鼠體外骨髓DC激活明顯，但不能顯著激活體內(nèi)血液和淋巴結(jié)中DC，且明顯低于L

4、BNSE-GM-SCF組;
　　5.免疫小鼠后，在第7、14天LBNSE-CXCL13較LBNSE-GM-CSF和LBNSE能明顯提高對(duì)TFH和GC B細(xì)胞的激活;
　　6.免疫后第2周肌肉攻毒50 LD50 CVS-24，發(fā)現(xiàn)LBNSE-CXCL13能顯著提高小鼠的保護(hù)率(95％)，明顯高于LBNSE組(50％)及LBNSE-GM-CSF組(70％)。
　　綜上所述，本研究說明表達(dá)小鼠CXCL13的重組狂犬病病毒LB