MALDI基體與單糖、寡糖非共價(jià)相互作用的ESI-MS研究.pdf

1、本文運(yùn)用電噴霧質(zhì)譜法(electrospray ionization mass spectrometry，ESI/MS)研究了11種MALDI(matrix-assisted laser desorption/ionization)基體分別與單糖(木糖、葡萄糖和果糖)、寡糖(蔗糖、麥芽糖、乳糖、海藻糖、β-環(huán)糊精)之間的非共價(jià)相互作用。11種基體中，包括8種一元基體：3-氨基喹啉(3-AQ)、2，5-二羥基苯甲酸(DHB)，α-氰基-4

2、-羥基肉桂酸(HCCA)、阿魏酸(CFIA)、1-羥基異喹啉(1-HIQ)、3-氨基香豆素(3-AC)、2-氨基.5-硝基吡啶(ANP)、5-甲氧基水楊酸(5-MSA)；3種二元基體：DHB/3-AQ、DHB/1-HIQ、DHB/5-MSA。在不同的基體溶劑、基體與糖的濃度及配比、儀器參數(shù)等實(shí)驗(yàn)條件下，考察了MALDI基體與糖之間的非共價(jià)相互作用以及影響基體-糖非共價(jià)復(fù)合物形成及穩(wěn)定的因素。研究結(jié)果表明： 1.采用ESI/MS方

3、法，在正離子模式下：只能檢測(cè)到一元堿性基體3-AQ及其二元基體DHB/3-AQ中堿性組分3-AQ與木糖形成的非共價(jià)復(fù)合物離子[M<,xylose>+M<,3-AQ>-H<,2>O+H]<'+>以及與β-環(huán)糊精形成的非共價(jià)復(fù)合物離子[M<,β-CD>+M<,3-AQ>+H]<'+>。在負(fù)離子模式下：能夠檢測(cè)到所有酸性一元基體DHB、HCCA、CFA、5-MSA與單糖、寡糖形成的非共價(jià)復(fù)合物離子[M<,糖>+M<,基體>-H]<'->以及二

4、元基體DHB/3-AQ、DHB/1.HIQ與糖形成的復(fù)合物離子[M<,糖>+M<,DHB>-H]<'->、DHB/5-MSA與糖形成的非共價(jià)復(fù)合物離子[M<,糖>+M<,DHB>-H]<'->和[M<,糖>+M<,5-MSA>-H]<'->。在正負(fù)離子模式下都檢測(cè)不到1-HIQ、3-AC、ANP與糖的復(fù)合物離子。 2.基體-糖復(fù)合物中基體與糖的化學(xué)計(jì)量關(guān)系為1∶1。 3.基體-單糖、基體-寡糖復(fù)合物的形成及離子峰強(qiáng)度與基

5、體的電離效率有關(guān)?；w的電離效率越高，越容易與單糖、寡糖分子發(fā)生非共價(jià)相互作用形成復(fù)合物離子。 4.基體溶劑對(duì)復(fù)合物離子的形成有顯著影響，除了CFA在乙腈中與糖分子結(jié)合作用最強(qiáng)之外，其他基體均在甲醇溶劑中與糖產(chǎn)生最強(qiáng)的非共價(jià)復(fù)合物離子峰；基體溶劑的PH值越小，越不利于酸性基體-糖非共價(jià)復(fù)合物負(fù)離子的形成。 5.3種二元基體均能夠與糖作用形成[M<,糖>+M<,DHB>-H]<'->復(fù)合物離子，與糖產(chǎn)生[M<,糖>+M<,

6、DHB>-H]<'->峰的強(qiáng)弱順序是：DHB/1-HIQ>DHB/3-AQ>DHB/5-MSA。 6.負(fù)離子模式下，基體-單糖、基體-雙糖復(fù)合物離子的形成過(guò)程為： M<,單糖或雙糖>+[M<,基體-H>]<'->→[M<,單糖或雙糖>+M<,基體>-H]<'->基體與β-環(huán)糊精復(fù)合物離子的形成過(guò)程可能為： [M<,β-CD>-H]M<'->+M<,基體>→[M<,β-CD>+M<,基體>-H]<'->。 7.單糖難以用E