兔后肢缺血再灌注損傷與血清IL-1、IL-6和TNF-α關(guān)系的研究.pdf

1、目的：通過建立家兔后肢缺血再灌注模型,測定家兔血清IL-1、IL-6,TNF-α濃度在后肢缺血再灌注發(fā)生和發(fā)展過程中的變化,研究炎性因子IL-1、IL-6,TNF-α在肢體缺血再灌注損傷中的作用,為臨床預(yù)防和治療肢體缺血再灌注損傷提供實驗依據(jù)。
　　方法：20只新西蘭家兔,平均體重3kg,雌雄不限,隨機分成假手術(shù)組和缺血再灌注組(制作兔子右后肢缺血再灌注模型,IR組),每組分別于缺血前0h與缺血4 h再灌注后3、6、9、12、15

2、h采血。所取血液靜置1 h后常溫離心10min(3000 r/min),分離血清,裝入EP管,-80℃保存。ELISA法測定各組血清IL-1、IL-6, TNF-α的濃度。并分別取右后肢肌肉組織用濾紙吸干血跡后立即放入稀甲醛溶液中固定。標(biāo)本經(jīng)脫水、石蠟包埋等做成10μm厚的切片,每張切片用蘇木精及伊紅染色,由同一個觀察者按照單盲的原則評估。
　　結(jié)果：1.與假手術(shù)組比較,IR組各時點血清IL-1、IL-6、TNF-α的濃度顯著升高

3、(P<0.05),并且各炎性因子血漿濃度隨再灌注時間延長升高,而假手術(shù)組不同時段各炎性因子變化差異無顯著性(P>0.05)。
　　2.缺血再灌注后IL-1、TNF-α在9h達到峰值(P<0.05),而假手術(shù)組不同時段各炎性因子變化差異無顯著性(P>0.05)。
　　3.缺血再灌注后IL-6在12h達到峰值(P<0.05),而假手術(shù)組不同時段各炎性因子變化差異無顯著性(P>0.05)。
　　4.對下肢肌肉切片進行鏡下檢查

4、可見,假手術(shù)右下肢的是正常骨骼肌結(jié)構(gòu)。再灌注后右后肢的肌肉切片可見炎癥反應(yīng)及肌間隙水腫,但肌肉組織正常未見明顯壞死。
　　結(jié)論：1.成功制備了兔子后肢缺血再灌注損傷模型;
　　2.血清炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α參與了缺血再灌注對后肢的損傷;
　　3.檢測炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α在缺血再灌注后不同時段的血清濃度可作為缺血再灌注損傷發(fā)生和發(fā)展的監(jiān)測指標(biāo);
　　4.IL-6可預(yù)測組織損傷的嚴(yán)重