新生鼠缺氧缺血性腦損傷水通道蛋白4的表達(dá)及與TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等變化的關(guān)系.pdf

1、目的： 1.復(fù)制新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBI)模型，觀察腦組織病理變化，動(dòng)態(tài)觀察血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、血清白介素-1β(IL-1β)、血清白介素-6(IL-6)、血清白介素-8(IL-8)的變化水平。 2.復(fù)制新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBI)模型，觀察腦組織中水通道蛋白4的表達(dá)及變化，同時(shí)檢測(cè)腦組織勻槳中腫瘤壞死因子(TNF-α)的變化，并探討二者之間的關(guān)系。 方法: 第一部分復(fù)制HIBI

2、模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用出生后7天、體重12～19g的SD大鼠。 HIBI組共30只，分0h、1h、2h、4h、8h、12h共6組，每組5只。實(shí)驗(yàn)對(duì)象在氯胺酮麻醉下(劑量按100mg/kg)行右頸動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)，在室溫下放置1～2小時(shí)后進(jìn)行低氧處理：將動(dòng)物置于37℃恒溫的密封容器中，給以8％O<,2>+92％N2混合的氣體2小時(shí)，之后分別按6組在相應(yīng)時(shí)間取出。 對(duì)照組：SD大鼠5只，不做處理，置于常溫常氧環(huán)境4h。 1.采用

3、蘇木素-伊紅(H.E)染色法觀察腦組織病理形態(tài)，反映缺氧缺血后腦組織的病理變化。 2.采用放射免疫法測(cè)定血清TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8的水平。 第二部分復(fù)制HIBI模型：方法如第一部分。 1.采用免疫組化染色方法觀察新生鼠缺氧缺血性腦損傷時(shí)不同時(shí)相腦中水通道蛋白4的表達(dá)。 2.采用放免法測(cè)定不同時(shí)相腦組織勻槳中TNF-α含量。 結(jié)論: 1.頸動(dòng)脈結(jié)扎加低氧處理可以成功復(fù)制新

4、生鼠缺氧缺血性腦損傷模型，且細(xì)胞內(nèi)水腫在缺氧缺血后2小時(shí)即已明顯出現(xiàn)。 2.發(fā)生缺氧缺血損傷后腦組織的病理變化主要是細(xì)胞內(nèi)水腫、腦出血、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。隨著缺氧缺血的時(shí)間延長(zhǎng)，病理?yè)p傷的程度也逐漸加重。TNF-α、IL-1β、IL-8于缺血缺氧后明顯升高，IL-6于缺血缺氧后先升高后降低，表明細(xì)胞因子均參與了缺氧缺血性腦病。 3.缺氧缺血后腦組織AQP4主要表達(dá)在脈絡(luò)叢、室管膜上皮、海馬及水腫區(qū)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，AQP4表