青蒿素對(duì)CLP膿毒癥模型大鼠的治療作用研究.pdf

1、目的：膿毒癥(sepsis)是感染因素介導(dǎo)的全身性炎癥反應(yīng)綜合癥，是臨床危重病患者的主要死亡原因之一。最近美國(guó)和歐洲的流行病學(xué)調(diào)查表明，膿毒癥的發(fā)病率約為住院病人的2-11％，其中重癥膿毒癥和膿毒性休克患者的死亡率則高達(dá)30-60％以上。目前臨床上尚缺乏針對(duì)細(xì)菌膿毒癥的有效防治措施。 青蒿素(Artemisinin，ART)是從植物黃花蒿中分離得到的抗瘧有效單體，臨床上主要用于治療耐藥的惡性瘧疾。曾有研究表明青蒿素及其衍生物對(duì)內(nèi)

2、毒素引起的炎癥反應(yīng)具有一定的抑制作用。本文采用大鼠盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(Cecalligationandpuncture，CLP)建立膿毒癥大鼠模型，旨在觀察ART對(duì)CLP膿毒癥模型大鼠的治療作用，并探討其作用機(jī)制。 方法：①采用不同型號(hào)的穿刺針貫穿大鼠盲腸2-3次并結(jié)扎，觀察CLP大鼠的72h存活情況，以72h死亡率在70-80％作為理想的膿毒癥模型。②采用ART灌胃處理，觀察ART對(duì)CLP大鼠72h的保護(hù)率；ELISA法檢測(cè)ART

3、組對(duì)CLP模型大鼠術(shù)后2、6、12、24、48和72h的血漿內(nèi)毒素(1ipopolysaccharide，LPS)、腫瘤壞死因子α(tumornecrosisfactoralpha，TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)水平的影響；并在同時(shí)相點(diǎn)測(cè)定大鼠肝組織TNF-α、IL-6和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)的含量；在光鏡和

4、透射電鏡下觀察12、24、48h大鼠腸組織病理形態(tài)學(xué)的變化；③分離大鼠腹腔巨噬細(xì)胞(peritonealmacrophages，PMФ)，ELISA法檢測(cè)ART對(duì)LPS(100ng/ml)及熱滅活大腸桿菌(Escherichiacoli，E.coli，3.5×107CFU/m1)刺激PMФ釋放TNF-α及IL-6的影響。 結(jié)果：①采用16號(hào)穿刺針貫穿盲腸3次制備的CLP模型大鼠72h死亡率穩(wěn)定在70-80％左右，初步建立了穩(wěn)定的

5、大鼠CLP模型。②ART組大鼠72h的死亡率顯著低于對(duì)照組(p＜0.01)；ART組術(shù)后血漿LPS、TNF-α及IL-6的峰值均顯著低于對(duì)照組(p＜0.05或p＜0.01)，其肝組織TNF-α、IL-6水平與MDA含量也不同程度地低于對(duì)照組，12h后ART組動(dòng)物肝組織SOD的活力顯著高于對(duì)照組(p＜0.05或p＜0.01)，腸組織的病理學(xué)改變減輕；③ART對(duì)LPS和熱滅活E.coli誘導(dǎo)的PMФ釋放TNF-α和IL-6，均具有顯著的抑制

6、作用并呈良好的量效關(guān)系(p＜0.01)。 結(jié)論：建立了穩(wěn)定的膿毒癥大鼠模型，研究證實(shí)ART對(duì)CLP模型大鼠具有顯著的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與下列因素相關(guān)： 1.ART通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)細(xì)胞的活化，減輕了TNF-α和IL-6等炎癥介質(zhì)釋放所導(dǎo)致的全身性炎癥反應(yīng)。 2.ART減輕CLP模型大鼠肝組織的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，可能相對(duì)增加了肝組織對(duì)LPS的滅活能力，進(jìn)而降低了CLP模型大鼠的血漿LPS水平；此外，ART對(duì)CLP模型