空腸彎曲菌PEB1介導(dǎo)的腸粘膜高親和力rBCG的制備及鑒定.pdf

1、背景：卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)在長期的臨床應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)研究中被發(fā)現(xiàn)可以誘導(dǎo)機(jī)體的Th1免疫優(yōu)勢應(yīng)答[1],不僅如此,BCG的許多成分也可以單獨(dú)誘導(dǎo)Th1免疫優(yōu)勢。因此,我們設(shè)想將過敏原Der p2基因轉(zhuǎn)入BCG中表達(dá),經(jīng)過免疫,機(jī)體將過敏原當(dāng)作BCG的成分進(jìn)行抗原提呈,選擇適當(dāng)?shù)耐緩浇臃N,就可能誘導(dǎo)出所需要的免疫狀態(tài)。本課題組前期的工作已經(jīng)證實(shí):Der p2可以在原核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá),且表達(dá)量可達(dá)總

2、蛋白量的20％[2,3]。為了提高重組BCG與腸道黏膜的親和力,我們選擇空腸彎曲菌膜外蛋白PEB1為媒介,利用重組BCG技術(shù),再次克隆入Der p2-rBCG中,并進(jìn)行鑒定,以進(jìn)一步提高疫苗的免疫效能。
　　目的：利用重組BCG技術(shù),構(gòu)建能以胞壁形式表達(dá)屋塵螨Der p2和PEB1抗原的重組BCG口服哮喘疫苗pCW-Der p2-PEB1-rBCG。
　　實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果：以pCW-Der p2質(zhì)粒和pUC-PEB1質(zhì)粒DNA