PLGF、Bcl-2及FasL在胎兒生長(zhǎng)受限中的研究.pdf

1、胎兒生長(zhǎng)受限(fetal growth restriction，簡(jiǎn)稱FGR)是指孕37周后，胎兒出生時(shí)體重小于2500g；或者低于同孕齡平均體重的兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差；或者低于同孕齡正常體重的第10個(gè)百分位數(shù)。其發(fā)病率2.75％～15.53％不等，并且圍產(chǎn)兒的死亡率為正常兒的4～6倍，是引起圍產(chǎn)期的重要并發(fā)癥之一，居圍產(chǎn)兒死亡原因第二位。他不僅導(dǎo)致胎兒發(fā)育異常，遠(yuǎn)期也影響兒童期及青春期的體能與智能發(fā)育，心血管及糖尿病等患病率也明顯升高。胎兒生長(zhǎng)受

2、限的病因在國(guó)內(nèi)外已有較多的研究，但目前病因仍不十分明確。
　　 目的
　　 為探討FGR孕婦母血、臍血中胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(placenta growth factor，PLGF)水平及胎盤(pán)組織中的Bcl-2(B-cell lymphoma/lenkemiaz，Bcl-2)與FasL(Fasrymndrit Fas，F(xiàn)asL)表達(dá)情況，以及探討三者間的相關(guān)性及其在FGR發(fā)生中的作用。
　　 材料與方法
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3、研究對(duì)象選擇鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院2008年7月至2009年5月住院分娩的FGR孕婦40例，同期住院的正常孕婦(對(duì)照組)30例。兩組孕婦平均年齡為(27.35±2.46)歲，平均孕齡為(38.52±1.28)周。所有孕婦均為單胎、初產(chǎn)婦、月經(jīng)周期規(guī)律、排除肝腎功能異常、無(wú)任何妊娠合并癥和并發(fā)癥、無(wú)宮縮、剖官產(chǎn)分娩者。
　　 2標(biāo)本采集
　　 孕婦分娩前抽取肘靜脈血3ml，胎兒娩出后立即抽臍靜脈血3ml。標(biāo)本采集后經(jīng)離心(3

4、000r/min，10min)，吸取上清液后放入-80℃冰箱凍存待檢。胎盤(pán)自然娩出后迅速取母體面中央(避免鈣化灶)處約1.0cm×1.0cm×1.0cm小塊組織，標(biāo)本采集后立即用生理鹽水沖洗，洗凈血液后置入10％甲醛溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋，5μm連續(xù)切片。常規(guī)HE染色，分別觀察胎盤(pán)組織形態(tài)以判斷切片好壞。
　　 3結(jié)果判定
　　 用酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)兩組臍血、母血血清中PLGF濃度，用免疫組化SP法檢測(cè)胎盤(pán)

5、組織中Bcl-2、FasL表達(dá)。以PBS液代替一抗作陰性對(duì)照，并設(shè)陽(yáng)性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)操作。
　　 胎盤(pán)組織中細(xì)胞膜和/或細(xì)胞漿呈黃色或棕黃色顆粒者為陽(yáng)性表達(dá)，以陽(yáng)性區(qū)平均灰度值為檢測(cè)指標(biāo)。每張免疫組化切片隨機(jī)選取5個(gè)具有代表意義的高倍視野(10×40)，計(jì)算其陽(yáng)性區(qū)平均光密度值。采用上海山富科學(xué)儀器有限公司的Biosens Digatal Imaging Systerm對(duì)兩指標(biāo)進(jìn)行灰度值分析。
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6、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
　　 采用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)均采用((?)±s)表示，并且對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，兩個(gè)均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，兩因素相關(guān)性采用直線相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1兩組研究對(duì)象一般資料比較：FGR組與對(duì)照組相比，年齡和孕周的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2 PLGF在兩組母血、臍血中的表達(dá)比較：FGR組與對(duì)照組相比，F(xiàn)GR組明顯低于對(duì)

7、照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3 Bcl-2在兩組胎盤(pán)組織中的表達(dá)：在正常組胎盤(pán)組織中Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)于細(xì)胞胞漿或細(xì)胞膜，在FGR中相對(duì)于正常組織顯示弱陽(yáng)性低表達(dá)。FGR組和對(duì)照組胎盤(pán)組織每高倍鏡視野平均灰度值分別為(59.77±9.77)、(79.45±7.19)；FGR組中Bcl-2平均灰度值明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4 FasL在兩組胎盤(pán)組織中的表達(dá)：Fa

8、sL在正常胎盤(pán)組織胞膜中強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，在FGR中呈弱陽(yáng)性表達(dá)。FGR組和對(duì)照組每高倍鏡視野平均灰度值分別為(64.05±8.78)、(83.72±9.61)；FGR組中FasL平均灰度值明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 5 PLGF與兩組胎盤(pán)組織中Bcl-2、FasL蛋白表達(dá)的相關(guān)性：對(duì)照組母血、臍血中PLGF與Bcl-2、FasL表達(dá)無(wú)相關(guān)性(P均＞0.05)。FGR組母血、臍血中PLGF與Bcl-2、F