99mTc-MIBI、18F-FDG及18F-FLT攝取率變化早期評價(jià)耐藥人乳腺癌細(xì)胞化療療效的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分，99mTc-MIBI攝取率變化早期評價(jià)耐藥人乳腺癌細(xì)胞化療療效的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：建立人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol體外攝取99mTc-MIBI實(shí)驗(yàn)的方法學(xué)，觀察不同濃度5-FU作用人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol后99mTc-MIBI攝取的變化，分析其與細(xì)胞增殖間的關(guān)系，評估其用于早期評價(jià)乳腺癌化療反應(yīng)的可行性。
　　方法：測定人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7在不同實(shí)驗(yàn)

2、條件下99mTc-MIBI攝取率：細(xì)胞數(shù)量1.25×105~2.5×106/孔，孵育時(shí)間20~120min，99mTc-MIBI的放射性活度1.85~29.6KBq，葡萄糖濃度0~11.1mmol/L。選取合適的實(shí)驗(yàn)條件。測定人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用不同時(shí)間（24h、48h、72h）99mTc-MIBI攝取情況，并分別計(jì)算各自的細(xì)

3、胞攝取抑制率（△MIBI）=(對照組細(xì)胞攝取率－實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞攝取率)/對照組細(xì)胞攝取率。用MTT法檢測各組細(xì)胞的生長抑制情況。單因素方差分析及相關(guān)分析判斷99mTc-MIBI攝取抑制率與細(xì)胞增殖之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7對99mTc-MIBI攝取在一定范圍內(nèi)與細(xì)胞數(shù)量、孵育時(shí)間、葡萄糖濃度有關(guān)，與放射性活度無關(guān)。細(xì)胞數(shù)為1×106/孔，孵育時(shí)間100min，葡萄糖濃度0mmol/L，99mTc-MIBI放射性活

4、度3.7KBq時(shí)，MCF-7細(xì)胞99mTc-MIBI攝取率可達(dá)到（21.58±1.37）%，明顯高于其耐藥株MCF-7/Taxol。不同濃度5-FU作用后，人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的99mTc-MIBI攝取與細(xì)胞增殖均受到不同程度的影響，呈藥物濃度依賴性。（1）MCF-7細(xì)胞99mTc-MIBI攝取抑制率（△MIBI）在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（25.0

5、8±6.23）%、（32.02±5.84）%、（34.63±7.42）%、（34.70±2.64）%；48h分別為：（68.57±4.67）%、（77.06±8.95）%、（82.21±4.70）%、（83.27±4.10）%；72h分別為（77.32±1.79）%、（91.62±1.33）%、（93.01±1.62）%、（93.58±1.00）%；48h、72h組△MIBI與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，r、P值分別為（r=0.484, P

6、＜0.05）及（r=0.672, P＜0.01）。（2）MCF-7/Taxol細(xì)胞99mTc-MIBI攝取抑制率在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（23.43±2.93）%、（30.21±8.46）%、（30.23±8.58）%、（35.11±8.44）%；48h分別為：（38.11±4.93）%、（41.65±6.98）%、（42.37±1.02）%、（49.85±9.73）%；72h分別為

7、（46.18±1.93）%、（48.20±7.43）%、（49.21±1.79）%、（62.73±5.16）%；且48h組△MIBI與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，r、p值為（r=0.438, P＜0.05）。
　　結(jié)論：人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的99mTc-MIBI攝取率高于其耐藥株MCF-7/Taxol。99mTc-MIBI攝取率變化可以用來評估乳腺癌化療療效。
　　第二部分，18F-FDG攝取率變化早期評價(jià)耐藥人乳腺癌細(xì)胞化

8、療反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：建立人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol體外攝取18F-FDG的實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，觀察不同濃度5-FU作用人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol后18F-FDG攝取率的變化，觀察其用于評價(jià)5-FU對MCF-7及MCF-7/Taxol細(xì)胞化療療效的價(jià)值。
　　方法：測定人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7在不同實(shí)驗(yàn)條件下18F-FDG攝取率：細(xì)胞數(shù)量1.25×105~2.5×10

9、6/孔，孵育時(shí)間20~120min，18F-FDG的放射性活度1.85~29.6KBq，葡萄糖濃度0~11.1mmol/L。選取合適的實(shí)驗(yàn)條件。測定人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株 MCF-7/Taxol在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用不同時(shí)間（24h、48h、72h）18F-FDG攝取情況，并分別計(jì)算各自的細(xì)胞攝取抑制率（△FDG）=(對照組細(xì)胞攝取率－實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞攝取率)/對照組細(xì)胞攝取率

10、。采用流式細(xì)胞儀法檢測MCF-7細(xì)胞的凋亡情況，結(jié)合第一部分MTT結(jié)果，行單因素方差分析及相關(guān)分析，判斷18F-FDG攝取抑制率與細(xì)胞增殖之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7對18F-FDG攝取在一定范圍內(nèi)與細(xì)胞數(shù)量、孵育時(shí)間及葡萄糖濃度有關(guān)，與放射性活度無關(guān)。細(xì)胞數(shù)為1×106/孔，孵育時(shí)間100min，葡萄糖濃度0mmol/L，放射性活度3.7KBq時(shí)，MCF-7細(xì)胞18F-FDG攝取率可達(dá)到（41.26±0.86

11、）%，高于其耐藥株MCF-7/Taxol。不同濃度5-FU作用后，人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的18F-FDG攝取和細(xì)胞凋亡均受到不同程度的影響，呈藥物濃度依賴性。（1）MCF-7細(xì)胞18F-FDG攝取抑制率（△FDG）在5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（40.03±6.19）%、（48.05±7.57）%、（51.88±3.10）%、（55.69±2.69）%

12、；48h分別為：（76.21±4.05）%、（82.13±6.42）%、（87.33±2.47）%、（89.03±2.99）%；72h分別為（47.99±2.70）%、（49.20±0.78%、（51.44±1.13）%、（62.13±4.52）%；24h、48h、72h組△FDG與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，r、P值分別為（r=0.600, P＜0.01）、（r=0.841, P＜0.01）及（r=0.708, P＜0.01）。（2）MC

13、F-7/Taxol細(xì)胞18F-FDG攝取抑制率在5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為：（22.53±9.74）%、（40.75±3.44）%、（49.40±6.23）%、（64.58±5.52）%；48h分別為：（52.05±4.02）%、（78.81±2.50）%、（86.54±0.44）%、（87.26±1.23）%；72h分別為（16.23±3.50）%、（27.74±6.79）%、（47

14、.83±3.76）%、（53.78±6.52）%；48h、72h組△FDG與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，r、P值分別為（r=0.726, P＜0.01）及（r=0.586, P＜0.01）。
　　結(jié)論：5-FU作用后，人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的18F-FDG攝取均與MTT結(jié)果具有不同程度的相關(guān)性，48h時(shí)相關(guān)性極好。且與細(xì)胞早期凋亡相關(guān)。18F-FDG攝取變化可以早期評價(jià)5-FU對MCF-7及MCF-7

15、/Taxol細(xì)胞殺傷作用。
　　第三部分，18F-FLT攝取率變化早期評價(jià)人乳腺癌細(xì)胞化療療效的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的：建立人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7體外攝取18F-FLT的方法學(xué)，探討18F-FLT攝取率變化評價(jià)5-FU對人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的化療療效的意義。
　　方法：測定人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7在不同實(shí)驗(yàn)條件下18F-FLT攝取率：孵育時(shí)間20~120min，18F-FLT的放射性活度1.85~29.6KBq，葡萄

16、糖濃度0~11.1mmol/L。選取合適的實(shí)驗(yàn)條件。測定人乳腺癌細(xì)胞株 MCF-7在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h18F-FLT攝取的情況，并計(jì)算MCF-7細(xì)胞的攝取抑制率（△FLT）=(對照組細(xì)胞攝取率－實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞攝取率)/對照組細(xì)胞攝取率。
　　結(jié)果：人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7對18F-FLT攝取在一定范圍內(nèi)與孵育時(shí)間、葡萄糖濃度有關(guān)，與放射性活度無關(guān)。不同濃度5-FU作用24h

17、后，人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的18F-FLT攝取呈明顯的藥物濃度依賴性。（1）MCF-7細(xì)胞的18F-FLT攝取率在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h分別為（20.35±1.38）%、（16.52±0.85）%、（12.68±0.21）%、（9.84±0.36）%、（8.87±1.14）%。（2）MCF-7細(xì)胞的18F-FLT攝取抑制率（△FLT）在5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/m

18、L）作用24h分別為：（18.84±4.19）%、（37.69±1.03）%、（51.63±1.76）%、（56.43±5.63）%。
　　結(jié)論：人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的18F-FLT攝取與孵育時(shí)間、葡萄糖濃度有關(guān)，與放射性活度無關(guān)。18F-FLT攝取率變化在24h時(shí)就可以評價(jià)5-FU對MCF-7細(xì)胞化療的反應(yīng)。
　　第四部分，99mTc-MIBI及18F-FDG攝取率變化早期評價(jià)耐藥人乳腺癌細(xì)胞化療療效的比較研究

19、　　目的：比較耐藥人乳腺癌細(xì)胞99mTc-MIBI及18F-FDG攝取率變化評估乳腺癌化療療效的差異。
　　方法：選取合適的實(shí)驗(yàn)條件，測定人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol在不同濃度5-FU（0、0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用不同時(shí)間（24h、48h、72h）99mTc-MIBI及18F-FDG攝取情況，分別計(jì)算各自的細(xì)胞攝取抑制率（△MIBI/FDG）=(對照組細(xì)胞攝取率－實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞攝

20、取率)/對照組細(xì)胞攝取率。采用MTT法檢測各組細(xì)胞的生長抑制情況。通過單因素方差分析及相關(guān)分析判斷攝取抑制率與細(xì)胞增殖之間的關(guān)系，并進(jìn)行比較分析。
　　結(jié)果：不同濃度5-FU（0.125、0.25、0.5、1.0mg/mL）作用24h、48h、72h后，人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7及其耐藥株MCF-7/Taxol的攝取與細(xì)胞增殖均受到不同程度的影響。（1）MCF-7細(xì)胞在5-FU作用48h、72h時(shí)99mTc-MIBI攝取抑制率與細(xì)胞

21、增殖抑制率呈正相關(guān)，r、P值分別為（r=0.484, P＜0.05）及（r=0.672, P＜0.01）；MCF-7/Taxol細(xì)胞在5-FU作用48h時(shí)99mTc-MIBI攝取抑制率與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，r、p值為（r=0.438, P＜0.05）。（2）MCF-7細(xì)胞18F-FDG攝取抑制率與細(xì)胞增殖抑制率呈正相關(guān)，r、P值分別為（r=0.600, P＜0.01）、（r=0.841, P＜0.01）及（r=0.708, P＜0.