18F-FES的合成及其在乳腺癌細胞的示蹤作用研究.pdf

1、目的：
　　1.降低特異性雌激素受體顯像劑18F-氟雌二醇（18F-Fluoroestradio，18F-FES）的合成成本，完善質量控制項目，滿足臨床用量及安全性需求。
　　2.明確18F-FES對不同乳腺癌雌激素受體（Estrogen receptor，ER）表達水平細胞的示蹤作用，并初步探討其機制。
　　方法：
　　1.正交試驗（L1645）考察影響全自動合成裝置（Tracerlab FXFN）自動化合成1

2、8F-FES的因素，指標為前體量（mg）、核素量（mci）、乙腈使用次數(shù)（次）、鹽酸濃度（mol/L）、水解溫度（℃），以合成率為主要判斷標準，優(yōu)選最佳合成條件。
　　2.根據(jù)獲得的最佳合成條件，比較使用國產(chǎn)及進口兩種前體18F-FES的合成率及合成成本。
　　3.合成18F-FES的質量控制及建立細菌內毒素方法學。
　　4.體外培養(yǎng)人乳腺細胞株（MCF-10A）及乳腺癌細胞株（MCF-7，MDA-MB-231），分別

3、加入18F-FES1.85×105Bq（5μCi）孵育15、30、60、90、120和150 min后，采用γ放射計數(shù)器測定放射性計數(shù)（CPM），分析細胞18F-FES攝取量。
　　5.ER拮抗劑他莫昔芬（Tamoxifen，TAM）（5、10、20μmol/L）處理MCF-7細胞24、48、72h，MTT法測定細胞增殖；TAM處理72h的MCF-7細胞，加入18F-FES1.85×105Bq（5μCi）孵育60min，免疫組化技

4、術（immuno-histochemistry，IHC）測定細胞ER表達，γ放射計數(shù)器測定CPM，分析細胞18F-FES攝取量。
　　結果：
　　l.影響18F-FES合成的重要因素為：乙腈使用次數(shù)>前體量>溫度>核素量>鹽酸濃度；合成率高低與國內外前體來源無關，使用國內前體合成成本低。
　　2.建立的細菌內毒素檢查方法顯示，18F-FES注射液每1 mL含細菌內毒素量應<5EU（EU，內毒素單位），其1∶10倍的稀釋

5、液對細菌內毒素試驗無干擾作用。
　　3.體外培養(yǎng)的三種細胞株對18F-FES均有明顯攝取，18F-FES孵育90min攝取達峰。乳腺癌ER陽性的MCF-7細胞攝取值遠大于ER陰性的MDA-MB-231細胞及MCF-7細胞。
　　4.ER拮抗劑TAM明顯抑制MCF-7細胞增殖，呈時間劑量依賴性。細胞數(shù)減少，ER減少，MCF-7細胞18F-FES攝取值明顯下降。
　　結論：
　　1.在選定條件下，18F-FES的合成