纖維來源和細胞壁降解酶對豬腸道微生物多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響.pdf

1、本試驗旨在通過不同16S rRNA檢測技術探討纖維來源和細胞壁降解酶（植酸酶、纖維素酶和木聚糖酶的混合酶制劑）對豬回腸食糜和糞便中微生物菌群多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響。試驗選用8頭平均體重為30.1±1.5 kg的“杜×長×大”三元雜交生長豬，統(tǒng)一安裝回腸末端T型瘺管，隨機分為4組，每組兩個重復。研究主要包括兩批試驗，第一批試驗日糧為麥麩日糧(WB)、麥麩加酶日糧、大豆皮日糧(SH)和大豆皮加酶日糧，第二批試驗日糧為西蘭花日糧(BR

2、)、西蘭花加酶日糧、米糠日糧(RB)和米糠加酶日糧。每千克試驗日糧中混合酶制劑的添加水平為:纖維素酶1000 U、木聚糖酶5000 U和植酸酶1500U。每批試驗分4期完成，每期每組試驗豬按4×4拉丁方設計安排飼喂1種試驗日糧，每期試驗預試期為15天，正式期為6天，分別采集飼料、回腸末端食糜和糞便樣品并進行相關指標的測定，主要研究結(jié)果如下:
　　試驗一:小麥麩和大豆皮日糧及添加細胞壁降解酶對豬腸道微生物多樣性和揮發(fā)性脂肪酸濃度的影

3、響
　　本試驗旨在利用Illumina MiSeq高通量測序技術研究以小麥麩或大豆皮為單一纖維來源的日糧，以及添加細胞壁降解酶對豬回腸食糜和糞便微生物菌群多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響。結(jié)果表明，兩日糧組豬腸道微生物菌群的多樣性無顯著差異，但添加酶制劑顯著提高各組豬回腸食糜微生物的多樣性(P＜0.01)，糞便微生物的多樣性也有上升趨勢(P＜0.10)。小麥麩日糧組豬腸道微生物菌群中Lactobacillus、Veillonella

4、和Ruminococcaceae等的豐度顯著高于(P＜0.05)大豆皮日糧組，而菌群中Streptococcaceae、Peptostreptococcaceae、Lachnospiraceae、Treponema和Methanobrevibacter等的豐度則顯著低于(P＜0.05)后者。添加細胞壁降解酶可選擇性地改變各日糧組豬腸道內(nèi)Streptococcus、Enterococcus、Veillonella和Treponema等微生

5、物的豐度。大豆皮日糧組豬回腸食糜和糞便中乙酸、丙酸和總揮發(fā)性脂肪酸的濃度均顯著高于(P＜0.01)小麥麩日糧組。除去糞便中乙酸的濃度外，添加酶制劑提高回腸食糜和糞便中上述各類揮發(fā)性脂肪酸的濃度(P＜0.01)。
　　試驗二:西蘭花莖葉粉和米糠日糧及添加細胞壁降解酶對豬腸道微生物多樣性和揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響
　　本試驗旨在利用Illumina MiSeq高通量測序技術研究以西蘭花莖葉粉或米糠為單一纖維來源的日糧，以及添加細胞

6、壁降解酶對豬回腸食糜和糞便微生物菌群多樣性及揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響。結(jié)果表明，西蘭花日糧組豬回腸食糜微生物菌群的多樣性顯著高于米糠日糧組(P＜0.05)，且加酶后兩日糧組豬菌群的多樣性均顯著提高(P＜0.05)。西蘭花日糧組豬腸道內(nèi)纖維素降解菌Ruminococcus和Bacteroides、果膠降解菌Lachnospira和Peptostreptococcus等的豐度顯著高于(P＜0.05)米糠日糧組，而淀粉降解菌Lactobacil

7、lus以及阿拉伯木聚糖降解菌Eubacterium的豐度則顯著低于(P＜0.05)后者。添加酶制劑顯著影響降解淀粉的相關菌屬Lactobacillus、Veillonella和Megasphaera、果膠降解菌Lachnospira和Prevotella、木聚糖降解菌Eubacterium和纖維素降解茵Ruminococcus等的豐度。西蘭花日糧組豬糞便中總揮發(fā)性脂肪酸的濃度顯著高于米糠日糧組(P＜0.05)，且添加酶制劑顯著提高(P＜

8、0.05)各日糧組豬腸道內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸的濃度。
　　試驗三:高通量測序和T-RFLP法用于分析豬腸道微生物菌群多樣性的結(jié)果比較
　　本試驗采用試驗二獲得的回腸食糜和糞便樣品同時利用末端限制性片段長度多態(tài)性分析(terminal restriction fragment length polymorphism，T-RFLP)和Illumina MiSeq高通量測序兩種分子生物學檢測技術，比較兩種方法所得豬腸道微生物菌群多樣性、