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文檔簡介
1、 本實驗采用Percoll不連續(xù)梯度密度離心法純化人外周血PMN;以甲酰三肽(N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine,fMLP)和佛波酯(phorbolmyristateacetate,PMA)為刺激物激發(fā)PMN脫顆粒;應用酶反應比色法和ELISA法檢測PMN顆粒標志物髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、乳鐵蛋白(lactoferrin,LF)和溶菌酶(lysozyme,LZ
2、)釋放量;在倒置相差顯微鏡下觀察GCs快速抑制PMN脫顆粒的形態(tài)學變化;采用放免方法檢測PMN脫顆粒胞內cAMP水平;利用Fura-2/AM顯微熒光檢測技術檢測胞內游離鈣離子濃度([Ca2+]i)?! ”緦嶒灡砻?,大劑量GCs可以通過非基因組機制快速抑制人外周血中性粒細胞的脫顆粒,且胞內cAMP水平的升高、[Ca2+]i的降低是其可能的機制。我們首次提出GCs對PMN脫顆粒的快速非基因組抑制作用,為GCs的抗炎作用及其機制提供了新的思
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