溫化膠囊對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402凋亡和代謝的影響.pdf

1、目的：研究中藥復(fù)方制劑溫化膠囊對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402的凋亡和代謝的影響，本次研究力求在原有研究成果的基礎(chǔ)上，通過(guò)對(duì)人肝癌Bel-7402細(xì)胞株的體外培養(yǎng)，來(lái)進(jìn)一步觀察溫化膠囊對(duì)于腫瘤細(xì)胞的影響。 方法：實(shí)驗(yàn)共分四部分。第一部分：對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)，分設(shè)空白對(duì)照組、150μg/ml溫化膠囊組及750μg/ml溫化膠囊組三組，使用流式細(xì)胞儀分析溫化膠囊對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402凋亡的影響。利用

2、倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞株加藥前后的形態(tài)學(xué)變化。第二部分：速率法檢測(cè)溫化膠囊對(duì)Bel-7402細(xì)胞培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(LDH)水平的影響。第三部分：應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(ELISA)的檢測(cè)方法檢測(cè)溫化膠囊對(duì)Bel-7402細(xì)胞培養(yǎng)上清液中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)水平的影響。第四部分：應(yīng)用ELISA的檢測(cè)方法檢測(cè)溫化膠囊對(duì)Bel-7402細(xì)胞培養(yǎng)上清液中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)水平的影響。 結(jié)果：流式細(xì)胞儀檢測(cè)

3、顯示：與對(duì)照組相比較，溫化膠囊能夠提高Bel-7402細(xì)胞的凋亡率，其作用的強(qiáng)度與藥物的劑量呈正相關(guān)；細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，加入溫化膠囊后細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)了空泡樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞變小、一或變細(xì)變長(zhǎng)，或變圓，部分細(xì)胞脫落漂浮于培養(yǎng)基中，且隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng)和藥物濃度的增加，空泡樣結(jié)構(gòu)的數(shù)量亦呈進(jìn)行性增加，并可融合成大泡，其漂浮細(xì)胞也增多：對(duì)LDH細(xì)胞因子的檢測(cè)表明，溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)的LDH水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，但

4、溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)和溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)、溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)和對(duì)照組相比較，二者均沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)，本次研究中溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)的LDH水平明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，反應(yīng)出高劑量組的Bel-7402細(xì)胞細(xì)胞膜的受損程度高于對(duì)照組，即溫化膠囊對(duì)此種細(xì)胞株的細(xì)胞毒性作用強(qiáng)于對(duì)照組。應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)VEGF和TGF-β1兩因子的水平，溫化膠囊高劑量組

5、(750μg/ml)與對(duì)照組相比，TGF-β1上調(diào)，有顯著性差異(P<0.05)，溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)與對(duì)照組比較未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05)，而溫化膠囊對(duì)VEGF的作用不明顯，本次實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組、溫化膠囊低劑量組(150μg/ml)與溫化膠囊高劑量組(750μg/ml)三組相比較，P>0.05，均無(wú)顯著性差異。 結(jié)論：溫化膠囊立足《內(nèi)經(jīng)》有關(guān)腫瘤的論述，通過(guò)溫陽(yáng)散寒與化痰活血從而發(fā)揮溫陽(yáng)化氣散結(jié)的作用。全方僅五