尼美舒利對肝癌細胞Bel-7402增殖和凋亡的作用研究.pdf

1、背景: 肝癌是最常見的肝臟惡性腫瘤,占全世界腫瘤發(fā)生率的第五位,全球每年約有37萬多患者被新診斷為肝細胞癌.盡管肝癌的診斷和治療取得了一定的進展,但預后依然較差.研究肝癌的發(fā)病機制和摸索新的診斷、治療方法一直是人類不斷努力的方向.目前,選擇性COX2抑制劑對腫瘤細胞的作用已成為腫瘤研究的熱點之一.尼美舒利(Nimesulide)是一種人工合成的COX-2特異性抑制劑,對結(jié)直腸癌和其它消化道腫瘤的防治取得了較好的實驗和臨床效果.

2、 目的: 本研究擬通過MTT法、流式細胞術、RT-PCR、western blot等檢查,觀察Nimesulide在體外對人肝癌細胞株Bel-7402增殖和凋亡的影響,并探討其可能的作用機制. 方法: 將不同濃度的尼美舒利(50～300gM)作用于Bel-7402肝癌細胞,采用MTT法檢測Nimesulide對細胞增殖的影響,流式細胞術檢測凋亡百分率的改變,逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)檢測細胞內(nèi)COX

3、-2 mRNA、Bcl-2 mRNA及VEGFmRNA表達的改變,westem-blot法檢測細胞內(nèi)COX-2、Bcl-2及VEGF蛋白表達的變化. 統(tǒng)計學處理用SPSS13.0軟件完成,計量資料數(shù)據(jù)表示方式以平均值±標準差(Mean±SD),兩組計量資料采用非獨立樣本t檢驗,各組指標間的相關性采用Spearman等級相關分析. 結(jié)果: MTT實驗示:Nimesulide呈劑量依賴性抑制Bel-7402細胞增殖.

4、流式細胞術示:使用不同濃度Nimesulide作用于Bel-7402細胞48 h后,可誘導其凋亡,隨著藥物濃度增加,凋亡率顯著增加,差異有顯著性.同時伴有COX-2 mRNA、Bcl.2mRNA及VEGF mRNA表達的下調(diào),而且三者在蛋白水平的表達也顯著降低. 結(jié)論: 本實驗以肝癌細胞系Bel-7402為對象,研究尼美舒利對肝癌細胞的增殖抑制和凋亡誘導作用.研究結(jié)果表明Nimesulide可以顯著抑制Bel-7402細