多種生長因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)對(duì)肺組織修復(fù)的促進(jìn)作用.pdf

1、目的：
　　建立多種生長因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)（下稱“凝膠釋放系統(tǒng)”）的動(dòng)物模型，探討“凝膠釋放系統(tǒng)”在動(dòng)物體內(nèi)對(duì)肺組織增生與修復(fù)的影響。
　　方法：
　　將新西蘭兔9只,隨機(jī)分為3組，每組各3只，分別在全身麻醉下行介入操作。生長因子組：將含多種生長因子的纖維蛋白溶液7ml及合適濃度的凝血酶溶液0.7ml經(jīng)可彎曲性支氣管鏡向右肺中葉保留灌注，在灌注區(qū)形成“凝膠釋放系統(tǒng)”，使系統(tǒng)緩慢釋放出各種生長因子。無生長因子

2、組：纖維蛋白溶液7ml及凝血酶溶液0.7ml經(jīng)可彎曲性支氣管鏡向右肺中葉保留灌注。對(duì)照組：對(duì)右肺中葉行支氣管鏡檢查。術(shù)后14天，麻醉處死動(dòng)物，采集標(biāo)本，Sircol collagen assay試劑盒檢測(cè)肺總膠原蛋白含量（包括I-V型膠原）；免疫組化法檢測(cè)I型膠原蛋白表達(dá)；Western blot檢測(cè)II型膠原蛋白表達(dá)，HE染色檢測(cè)肺泡間隔厚度和肺間質(zhì)MVD(micro-vessel density，微血管計(jì)數(shù))，real time R

3、T-PCR檢測(cè)SPA（surfactant protein A，表面活性蛋白A）mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?。?）肺泡間隔厚度:對(duì)照組為38.389±9.160nm，無生長因子組為41.267±11.845nm，生長因子組為59.500±13.904nm。生長因子組與無生長因子組（P=0.000）、生長因子組與對(duì)照組（P=0.000）之間均存在顯著差異；而無生長因子組與對(duì)照組之間無顯著差異（P=0.462）。
　　

4、（2）肺總膠原蛋白含量：對(duì)照組為41.563±8.255，無生長因子組為45.349±19.039，生長因子組為89.261±24.837。生長因子組與無生長因子組（P=0.001，t=4.070）、生長因子組與對(duì)照組（P=0.000，t=4.421）之間存在顯著差異；而無生長因子組與對(duì)照組之間無顯著差異（P=0.731,t=0.351）。
　?。?）I型膠原蛋白表達(dá)：area sum（sum of staining positi

5、ve area,陽性區(qū)域面積總和）：對(duì)照組為3.9703104±5.1373104，無生長因子組為7.6363104±5.1013104，生長因子組為16.0253104±6.4833104。生長因子組與無生長因子組（P=0.000）、生長因子組與對(duì)照組（P=0.000）之間存在顯著差異；而無生長因子組與對(duì)照組之間無顯著差異（P=0.052）。AOD sum（sum of average optical density,平均光密度總和）

6、：對(duì)照組為101.118±99.448，無生長因子組為170.274±82.221，生長因子組為249.875±75.725。生長因子組與無生長因子組（P=0.000）、生長因子組與對(duì)照組（P=0.007）、無生長因子組與對(duì)照組（P=0.047）之間存在顯著差異。IOD sum（sum of integral optical density,積分光密度總和）：對(duì)照組為2.0303104±2.6223104，無生長因子組為3.910310

7、4±2.6213104，生長因子組為8.2563104±3.3163104。生長因子組與無生長因子組（P=0.000）、生長因子組與對(duì)照組（P=0.000）之間存在顯著差異；而無生長因子組與對(duì)照組之間無顯著差異（P=0.052）。
　?。?）II型膠原蛋白表達(dá)：待測(cè)樣品中未見明顯II型膠原蛋白表達(dá)。
　?。?）肺間質(zhì)MVD：對(duì)照組為2.667±1.155，無生長因子組為3.417±1.379，生長因子組為3.750±1.05

8、5。生長因子組與對(duì)照組之間有顯著差異（P=0.035，t=30.952）；而生長因子組與無生長因子組（P=0.502,t=0.664）、無生長因子組與對(duì)照組（P=0.137,t=5.474）之間無顯著差異。
　?。?）SPA mRNA含量：無生長因子組為1.87±2.09，生長因子組為7.53±6.64。生長因子組和無生長因子組之間無顯著差異（P=0.232，F(xiàn)=1.986）。
　　結(jié)論：
　　在新西蘭兔肺內(nèi)建立多種生