多種生長因子復合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)對人胚肺成纖維細胞增殖分化的影響.pdf

1、目的:通過體外建立并比較不同“多種生長因子復合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”，尋找促進人胚肺成纖維細胞生長增殖分化最佳釋放系統(tǒng)。
　　方法:測定培養(yǎng)基中“纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”釋放曲線，加入生長因子復合物（PDGF、TGF、VEGF、EGF），建立“多種生長因子復合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”。取傳至3~5代人胚肺成纖維細胞培養(yǎng)，分為有生長因子實驗組A和無生長因子對照組B兩組，每組分4亞組：①纖維蛋白凝膠全覆蓋組（A1、B1組）②纖維蛋白原

2、全覆蓋組（A2、B2組）③島狀凝膠組（A3、B3組）④碎片狀凝膠組（A4、B4組），設置無凝膠對照組C：生長因子組（C1組）、無生長因子組（C2組）。連續(xù)觀察7~14天，觀察細胞形態(tài)，測定細胞數，并用MTT法測定相對細胞活性，觀察比較不同釋放系統(tǒng)對細胞生長增殖的影響。
　　結果:（1）不同凝膠釋放系統(tǒng)釋放曲線的差異：島狀與碎片狀組凝膠釋放無統(tǒng)計學差異（P>0.05），纖維蛋白凝膠全覆蓋組與島狀、碎片組有統(tǒng)計學差異（P<0.001）

3、，全覆蓋組釋放高峰落后于島狀和碎片狀組。（2）A1、A2、B1、B2組均無細胞生長，A3、A4、B3、B4組細胞生長良好，增殖活躍。（3）凝膠內帶細胞生長增殖最慢，外帶最快，中帶介于兩者之間。隨著凝膠溶解，細胞向內帶遷移，增殖速度逐漸增快。（4）生長因子組細胞增殖速度明顯快于無生長因子組（P<0.001）。（5）生長因子組細胞生長情況：A4組優(yōu)于A3組及C1組，A3組優(yōu)于C1組（P<0.001）；無生長因子細胞生長情況：B4組優(yōu)于B3、

4、C2組，而C2組生長情況優(yōu)于B3組（P<0.001）。（6）細胞增殖情況評估細胞計數法和MTT法測得OD值存在一定線性關系，并呈正相關關系（生長因子組：A3組r=0.929，P<0.001；A4組r=0.863，P<0.001；C1組r=0.716，P<0.005。無生長因子組：B3組r=0.706，P<0.005；B4組r=0.423，P<0.05；C2組r=0.512，P<0.05)。
　　結論:1、多種生長因子復合物纖維蛋白