大鼠腦體感皮質(zhì)局灶性缺血后可塑性的初步研究.pdf

1、一、光化學(xué)誘導(dǎo)大鼠局灶性腦缺血模型的建立
　　缺血性腦血管病是目前人類的主要死亡原因之一,具有高發(fā)病率,高致殘率和高死亡率的特點.建立良好的腦缺血動物模型對研究急性腦梗死后的病理生理變化和篩選治療藥物具有重要意義。光化學(xué)法誘導(dǎo)血栓生成與人類血栓性腦梗死的發(fā)病過程較為相似,其照射所需光源波長與內(nèi)源光學(xué)信號成像(optical intrinsic signal imaging,OISI)技術(shù)相同.OISI技術(shù)是目前少數(shù)能實時觀察腦缺血

2、病理過程的技術(shù)之一。
　　本研究的目的是通過OISI技術(shù)觀測光化學(xué)誘導(dǎo)大鼠局灶性腦缺血模型梗塞區(qū)的血栓形成過程。目的建立一個穩(wěn)定的大鼠局灶性腦缺血模型,并通過OISI技術(shù)觀測血栓形成過程,判斷梗塞的形成,為實時研究腦缺血時的病理生理變化提供新的方法。
　　方法：利用光化學(xué)誘導(dǎo)血栓形成的原理,使大鼠局部皮質(zhì)完全梗塞,同時應(yīng)用OISI技術(shù)觀測血栓形成過程,通過TTC染色和EB染色觀察梗塞灶大小和血腦屏障的破壞情況。
　　結(jié)

3、果：光化學(xué)誘導(dǎo)過程中觀察到血栓形成,通過信號分析確定光化學(xué)誘導(dǎo)皮層梗塞所需時間為30min.該方法造模100％成功,大鼠無死亡(存活率為100%),腦梗塞后未見明顯肢體運動障礙。腦組織切片TTC染色證實梗塞灶在體感皮質(zhì)區(qū),大小基本恒定,EB染色顯示血腦屏障破壞。結(jié)論光化學(xué)誘導(dǎo)大鼠腦梗塞模型穩(wěn)定性好,死亡率低,是研究腦缺血的理想模型。OISI技術(shù)是動態(tài)觀察活體腦梗死過程中腦血流、血管和功能變化的有效方法。
　　二、康復(fù)訓(xùn)練對大鼠局灶

4、性腦梗死區(qū)周邊皮質(zhì)GFAP、GAP-43表達的影響
　　康復(fù)訓(xùn)練能促進腦梗死的行為學(xué)恢復(fù),改善運動功能,但其具體機制尚不清楚。目前認為腦卒中后的功能康復(fù)與腦的可塑性有關(guān)。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)是星形膠質(zhì)細胞特異表達的中間絲蛋白,其表達值增加被認為是膠質(zhì)細胞反應(yīng)性或功能活性增強的典型表現(xiàn)之一。生長相關(guān)蛋白-43(growth-associatedprotein-4

5、3,GAP-43)主要存在于神經(jīng)元的軸突中,是參與細胞形態(tài)和連接的調(diào)節(jié)蛋白,可以作為成熟中樞神經(jīng)系統(tǒng)中突觸重建和可塑性的標記物。
　　本文擬觀察局灶性體感皮質(zhì)缺血后,康復(fù)訓(xùn)練對GFAP與GAP-43表達的影響,研究缺血后腦功能恢復(fù)的可塑性機制。目的研究康復(fù)訓(xùn)練對大鼠局灶性腦梗死區(qū)周邊皮質(zhì)GFAP、GAP-43表達的影響,為康復(fù)訓(xùn)練治療腦缺血疾病提供理論依據(jù)。
　　方法：成年健康雄性SD大鼠隨機分為腦缺血模型組,康復(fù)訓(xùn)練組和假

6、手術(shù)對照組。采用光化學(xué)方法建立局灶性腦梗死模型,造模后置于普通籠中飼養(yǎng);康復(fù)訓(xùn)練組在模型組的基礎(chǔ)上進行電動跑臺訓(xùn)練,每天30 min;假手術(shù)對照組僅給予麻醉及頭皮切開、縫合,不進行光照射激活形成血栓。每組大鼠于術(shù)后7 d,14 d,21 d處死,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察各組大鼠不同時期梗死灶周圍皮質(zhì)GFAP和GAP-43的表達。
　　結(jié)果：7 d康復(fù)訓(xùn)練組和模型組大鼠梗死灶周圍皮質(zhì)GFAP陽性星形膠質(zhì)細胞發(fā)生肥大和增生性改變,顯著

7、高于對照組;康復(fù)訓(xùn)練組和模型組之間GFAP表達無明顯差異?？祻?fù)訓(xùn)練組梗死灶周圍皮質(zhì)GFAP的表達在14 d和21 d顯著高于模型組和對照組。模型組梗死灶周圍皮質(zhì)GFAP的表達在14 d和21 d顯著高于假手術(shù)對照組。康復(fù)訓(xùn)練組大鼠GAP-43表達在7 d為最高,14 d后開始下降,但均顯著高于模型組和假手術(shù)對照組。模型組大鼠GAP-43表達在7 d和14d高于假手術(shù)對照組。21 d時三組大鼠GAP-43表達無明顯差異。結(jié)論康復(fù)訓(xùn)練能促進