局灶性腦缺血大鼠腦組織比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的:建立局灶性腦缺血模型，從蛋白質(zhì)整體水平探討腦缺血/再灌注的保護(hù)作用機(jī)制。 方法:雄性、健康大鼠SD，隨機(jī)分為正常組、腦缺血模型組、茅莓總皂苷干預(yù)組和尼莫地平干預(yù)組。參照Koizumi法并加以改進(jìn)，建立MCAO大鼠腦缺血2h再灌注24h的模型；裂解液提取總蛋白質(zhì)，以雙向電泳技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)分離，考馬斯亮藍(lán)染色，獲得雙向電泳圖譜，利用專門的軟件篩選出差異蛋白質(zhì)，用MALDI-TOF-MS獲得肽指紋圖譜，MS-Fit數(shù)據(jù)庫進(jìn)行搜索

2、，獲得有關(guān)的蛋白質(zhì)信息。 結(jié)果: 1、以正常大鼠腦組織為研究對(duì)象，在不同的條件下進(jìn)行2-DE，所分離得到的蛋白質(zhì)點(diǎn)滿足質(zhì)譜分析的要求。 2、局灶性腦缺血模型組與正常組腦組織的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究。與模型組比較，從正常組篩選到23個(gè)差異表達(dá)蛋白斑點(diǎn)，其中13個(gè)低表達(dá)，10個(gè)高表達(dá)，鑒定其中6個(gè)蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞三烯A-4水解酶、促甲狀腺激素釋放激素降解胞外酶等與腦缺血相關(guān)的蛋白質(zhì)。 3、局灶性腦缺血模型組與茅

3、莓總皂苷干預(yù)組的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究。與模型組比較，從茅莓總皂苷干預(yù)組從找到了29個(gè)差異表達(dá)蛋白斑點(diǎn)，其中15個(gè)低表達(dá)，10個(gè)高表達(dá)，鑒定其中7個(gè)蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)FNF-α、L,TGF-2等與腦缺血相關(guān)的蛋白質(zhì)。 4、局灶性腦缺血模型組與尼莫地平干預(yù)組的比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究。與模型組比較，從尼莫地平干預(yù)組找到了25個(gè)差異表達(dá)蛋白斑點(diǎn)，其中10個(gè)低表達(dá)，15個(gè)高表達(dá)，鑒定其中6個(gè)蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)激肽原-1前體、谷氨酸受體4前體等與腦缺血相關(guān)的