螺旋藻多糖硫酸酯的制備及其抗腫瘤和免疫活性的初步研究.pdf

1、本論文主要對(duì)螺旋藻多糖(Polysaccharide。from Spirulina platensis，PSP)及其修飾后產(chǎn)物(Sulfated Polysaccharide from Spirulina platensis，SPSP)的性質(zhì)結(jié)構(gòu)、抗腫瘤及免疫活性進(jìn)行研究。 PSP是從海洋生物螺旋藻(Spirulina plantensis)中提取分離的均一葡聚糖，經(jīng)高效凝膠滲透色譜法(HPGPC)檢測(cè)分子量約410 KD，苯酚

2、-硫酸法檢測(cè)糖含量為94.18％，紫外和紅外掃描均無(wú)硫酸基團(tuán)的特征吸收。應(yīng)用氯磺酸-吡啶法對(duì)PSP進(jìn)行硫酸酯化修飾，修飾后的產(chǎn)物SPSP紅外和紫外圖譜均顯示有硫酸基團(tuán)的特征吸收峰，氯化鋇．明膠法測(cè)定其硫酸根含量為21.22％。 本文應(yīng)用MTT法和細(xì)胞形態(tài)觀察法考察了PSP和SPSP體外對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，運(yùn)用小鼠移植性腫瘤模型觀察了PSP和SPSP體內(nèi)對(duì)小鼠腫瘤的抑制作用。 結(jié)果表明：PSP在12.5～200μg

3、/mL的濃度范圍內(nèi)對(duì)Hela和SMMC-7721無(wú)細(xì)胞毒作用，100～200μg／mL的濃度對(duì)KB，SGC-7901和K562有一定的細(xì)胞毒作用，但抑制率均小于15％；SPSP在12.5～200μg／mL的濃度范圍內(nèi)對(duì)KB，Hela，SGC-7901，SMMC-7721， K562均有明顯的細(xì)胞毒作用，其中對(duì)KB，SGC-7901和SMMC-7721三種細(xì)胞的抑制作用較強(qiáng)，抑制率在15～37％之間。PSP50～100μg／mL，的濃度對(duì)

4、KB和SGC-7901細(xì)胞形態(tài)影響不大，25～100μg/mL濃度的SPSP對(duì)KB和SGC-7901細(xì)胞形態(tài)具有較明顯的影響。不同劑量的PSP對(duì)小鼠S180肉瘤和Heps肝癌有一定的抑制作用，但與模型組比較無(wú)顯著性差異；SPSP 50 mg／kg對(duì)小鼠S180肉瘤具有顯著的抑制作用，抑瘤率為32.7％，100 mg/kg對(duì)小鼠Heps肝癌具有顯著的抑制作用，抑瘤率為35.5％。PSP和SPSP對(duì)小鼠EAC腹水癌均無(wú)顯著抑制作用。

5、 本文通過(guò)觀察PSP和SPSP對(duì)正常小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和IL-2生成的影響、對(duì)正常小鼠碳粒廓清速率和血清溶血素水平、對(duì)荷瘤小鼠NK和CTL細(xì)胞殺傷活性的影響來(lái)研究它們對(duì)機(jī)體免疫功能的作用。結(jié)果顯示，PSP能促進(jìn)正常小鼠的脾淋巴細(xì)胞增殖和IL-2的生成，對(duì)荷瘤小鼠的NK細(xì)胞活性具有增強(qiáng)作用；SPSP能單獨(dú)并協(xié)同ConA或LPS促進(jìn)正常小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖，促進(jìn)正常小鼠脾淋巴細(xì)胞生成IL-2，提高正常小鼠的碳粒廓清速率和血清溶血素水平，并能增