人參多糖免疫活性及抗腫瘤作用.pdf

1、人參是歷史悠久的名貴中藥之一，在本草綱目中就有記載。二千多年來，人參一直用作民間延年益壽的補(bǔ)品，藥用價(jià)值已為世界公認(rèn)，至今盛用不衰?，F(xiàn)代中藥學(xué)研究表明，多糖是人參的有效成分，其藥理學(xué)活性體現(xiàn)在多個(gè)方面，如抗腫瘤、降血糖、抗疲勞、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)等。目前已經(jīng)有許多關(guān)于人參多糖生物活性的報(bào)道，但是缺乏對(duì)人參多糖結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系的系統(tǒng)研究。在本實(shí)驗(yàn)室人參多糖系統(tǒng)分級(jí)的基礎(chǔ)上，本文對(duì)人參多糖的各級(jí)分在細(xì)胞和動(dòng)物水平上進(jìn)行免疫活性和抗腫瘤作用的研究

2、，以揭示人參多糖的構(gòu)效關(guān)系。
　　 首先將人參根按照實(shí)驗(yàn)室以往的方法進(jìn)行了提取，得到人參總糖WGP。然后再將WGP用DEAE-纖維素離子交換柱層析在不同濃度的NaCl溶液洗脫下進(jìn)行分級(jí)，得到中性級(jí)分WGPN和酸性級(jí)分WGPA。WGPN為較單一的淀粉樣葡聚糖；WGPA為果膠類多糖混合物。將WGPA采用DEAE-纖維素離子交換柱層析分級(jí)，再經(jīng)由SepharoseCL-6B凝膠柱層析分級(jí)，最終得到6個(gè)均一級(jí)分：WGPA-1-AG、WG

3、PA-2-AG、WGPA-1-HG、WGPA-2-HG、WGPA-3-HG和WGPA-4-HG。另外，用內(nèi)切聚半乳糖醛酸酶將WGPA進(jìn)行水解，然后將產(chǎn)物經(jīng)離子交換層析和凝膠滲透層析分離得到5個(gè)具有RG-I結(jié)構(gòu)域的果膠RG-I-1、RG-I-2、RG-I-3A、RG-I-3B和RG-I-4。
　　 應(yīng)用正常小鼠對(duì)人參總糖、人參淀粉以及人參果膠進(jìn)行了初步的免疫活性的研究。結(jié)果顯示，三種級(jí)分對(duì)正常小鼠的非特異性免疫系統(tǒng)和特異性免疫系統(tǒng)

4、均具有一定的調(diào)節(jié)作用。體現(xiàn)在人參多糖可以誘導(dǎo)正常小鼠淋巴細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化、提高NK細(xì)胞的細(xì)胞毒的活性、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力及NO的生成能力。
　　 應(yīng)用荷S180肉瘤小鼠對(duì)以上三種級(jí)分的抗腫瘤作用進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示：與生理鹽水對(duì)照組相比，三種級(jí)分對(duì)于小鼠S180肉瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)均具有一定的抑制作用，但是三者的抗腫瘤效果要低于陽(yáng)性對(duì)照環(huán)磷酰胺給藥組；而對(duì)荷瘤小鼠的免疫活性檢測(cè)結(jié)果也顯示與正常小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用的趨勢(shì)相一致，即人參多糖不

5、僅能夠促進(jìn)小鼠脾臟T、B淋巴細(xì)胞的增殖的能力，還能夠刺激巨噬細(xì)胞的吞噬功能及產(chǎn)生NO的能力。再將以上三種級(jí)分與化療藥物5-氟尿嘧啶(5-FU)聯(lián)合使用，觀察其是否具有增效減毒的作用。初步結(jié)合的結(jié)果顯示，人參淀粉與5-FU聯(lián)用時(shí)，具有一定的協(xié)同抗腫瘤效果。
　　 對(duì)于組成比較單一、含量較大且具有良好活性的人參淀粉進(jìn)行了進(jìn)一步的協(xié)同抗腫瘤作用的研究。利用不同劑量(25、50、75、100和150 mg/kg/d)的人參淀粉單獨(dú)或與5

6、-FU(25 mg/kg/d)聯(lián)合作用。結(jié)果顯示W(wǎng)GPN能夠抑制小鼠S180腫瘤生長(zhǎng)，并呈鐘形劑量曲線分布，在50 mg/kg/d的劑量條件下，與5-FU的協(xié)同抗腫瘤效果最佳。免疫指標(biāo)檢測(cè)顯示W(wǎng)GPN單獨(dú)使用時(shí)能夠刺激淋巴細(xì)胞增殖，提高NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，增強(qiáng)細(xì)胞吞噬功能和巨噬細(xì)胞生成NO的能力，并且增加了血清中TNF-α的水平：而WGPN與5-FU聯(lián)合使用時(shí)，可以減輕5-FU對(duì)S180荷瘤小鼠免疫系統(tǒng)造成的損傷。上述結(jié)果說明人參淀粉

7、WGPN具有開發(fā)為化療藥物佐劑的潛力。
　　 對(duì)于結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜的人參果膠WGPA進(jìn)行活性比較研究，選用WGPA所提出的三種不同類型果膠樣品(AG型果膠：WGPA-1-AG、WGPA-2-AG；RG-I型果膠：RG-1-2、RG-I-3A、RG-I-3B、RG-I-4；HG型果膠：WGPA-1-HG、WGPA-2-HG、WGPA-3-HG、WGPA-4-HG)進(jìn)行了活性研究。人參果膠類多糖對(duì)淋巴細(xì)胞增殖能力具有促進(jìn)作用；可以增強(qiáng)巨