龍眼花芽成花逆轉(zhuǎn)的差異蛋白分析.pdf

1、龍眼是我國南方的特產(chǎn)水果之一，在內(nèi)銷和外貿(mào)上歷來有著重要的地位，在龍眼生產(chǎn)上，大小年結(jié)果問題是影響產(chǎn)量的主要原因，小年產(chǎn)量往往不及大年產(chǎn)量的一半，而龍眼花芽成花逆轉(zhuǎn)又被認(rèn)為是造成龍眼大小年結(jié)果的主要因素，因此，解決龍眼結(jié)果大小年問題，在生產(chǎn)上具有重要價值。本研究運用蛋白質(zhì)組學(xué)方法和技術(shù)對龍眼成花逆轉(zhuǎn)花芽蛋白質(zhì)與正常成花花芽蛋白進行比較研究。主要研究結(jié)果概括如下： 蛋白質(zhì)的提取是影響檢測蛋白質(zhì)種類多少和雙向電泳圖譜質(zhì)量的一個重要因

2、素，本文比較了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)和酚抽法(Phe)兩種方法對龍眼花芽蛋白的提取效果，結(jié)果表明：TCA法不能有效的提取龍眼花芽蛋白，而酚抽法得到的圖譜背景干凈，蛋白點清晰，說明酚抽法適用于龍眼花芽蛋白質(zhì)的提取。 通過比較龍眼正常成花和成花逆轉(zhuǎn)花芽的2-DE圖譜，共找出18個差異蛋白，其中有7個蛋白在成花逆轉(zhuǎn)花芽中呈上調(diào)表達，11個蛋白下調(diào)表達。差異蛋白經(jīng)膠內(nèi)酶解和MALDI-TOF-TOF/MS分析，獲得的PMF通過數(shù)

3、據(jù)庫檢索，鑒定成功13個蛋白，鑒定成功率為72％。 鑒定出的13個蛋白中，1個為未知蛋白，以一段基因序列命名，另外12個蛋白根據(jù)蛋白質(zhì)的功能可以把他們劃分為花粉育性相關(guān)蛋白(推斷的無色花色素還原酶2、異黃酮還原酶和脫落脅迫成熟相關(guān)蛋白)，抗氧化作用相關(guān)蛋白(B鏈Gap甘露糖-3’，5’異構(gòu)酶，推斷的乳酸酰谷胱甘肽裂解酶和A鏈抗壞血酸過氧化物酶)，光合作用相關(guān)蛋白(RuBisCo大亞基)，調(diào)節(jié)蛋白(蛋白激酶、20s蛋白酶體α亞基6