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1、本實(shí)驗(yàn)通過黃瓜離體子葉節(jié)花芽分化實(shí)驗(yàn)體系,初步探索糖種類和濃度對(duì)植物成花的影響;并應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法和生物信息學(xué)技術(shù),在蛋白質(zhì)水平上探討植物成花的機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下: 1、組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:無糖或高糖處理不利于成花。在添加0.3mg/L PP333的基礎(chǔ)上,1.5%蔗糖+1.5%果糖處理的直接花分化率最高;成花培養(yǎng)中蔗糖是基本的因素。果糖的最佳供應(yīng)時(shí)間在開始培養(yǎng)后的48-72h。在供糖基礎(chǔ)上,添加GA3處理對(duì)成花的影響不明顯
2、;添加ABA處理可提高直接花分化率;適度抑制乙烯有利于成花。 2、建立并優(yōu)化雙向電泳實(shí)驗(yàn)條件,結(jié)果表明:應(yīng)采用酚抽提法制備蛋白質(zhì)干粉,第一向等電聚焦固相pH梯度膠條(24cm)的最適蛋白上樣量為1200μg,第二向SDS-PAGE使用11.5%T的分離膠等條件,有助于提高黃瓜離體子葉節(jié)總蛋白質(zhì)雙向電泳的分辨率和重復(fù)性。 3、通過對(duì)PP333誘導(dǎo)的黃瓜離體子葉節(jié)花芽分化的差異蛋白研究,經(jīng)雙向電泳檢測(cè)到蛋白點(diǎn)有1000個(gè)左右
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