抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎患者血漿MicroRNA-140表達的初步研究.pdf

1、背景與目的:
　　抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎（Anti-N-methyl-D-aspartate Receptor Encephalitis）是一種自身免疫性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，可伴或不伴卵巢畸胎瘤;隸屬副腫瘤性疾病范疇。臨床上可有前驅(qū)期，出現(xiàn)持續(xù)不規(guī)律高熱、頭痛、流感樣癥狀;明顯的精神癥狀，包括焦慮，激越，行為怪異，幻覺，妄想，思維混亂，失眠，語言障礙及厭食或攝食過度表現(xiàn);記憶力下降、意識水平下降、癲癇發(fā)作、運動功能障

2、礙和自主神經(jīng)功能紊亂。腦電圖可呈特異性“δ刷”，腦脊液或血清抗NMDAR抗體檢測被認為是診斷該疾病的特異性抗體?？筃MDA受體腦炎可發(fā)病于任何年齡，以兒童和女性多見;女性發(fā)病的中位數(shù)年齡為23歲，而卵巢畸胎瘤的檢出與年齡具有相關(guān)性，大于18歲女性56％有單側(cè)或雙側(cè)卵巢畸胎瘤，而小于14歲的女孩則只有不到9％;臨床數(shù)據(jù)證實早期治療有效，早期診斷、早期免疫抑制劑治療以及伴腫瘤患者施行腫瘤切除對疾病的預(yù)后是積極的。但是該腦炎發(fā)病機制未明，目前

3、無確診“金標準”，且該疾病臨床表現(xiàn)個體異質(zhì)性較大，診斷較困難，臨床癥狀范圍廣，具有潛在的致死風(fēng)險。因此需要進一步研究，尋找確診該疾病的穩(wěn)定、準確率高、靈敏性高的診斷標志物。
　　MicroRNAs(miRNAs)是一類高保守性、非編碼dxRNA分子，長度約22個核苷酸，通過與靶基因3'端非翻譯區(qū)(3'.UTR)的不完全堿基配對導(dǎo)致靶mRNA降解或翻譯抑制，從而在真核生物中對基因表達起著負調(diào)控作用。循環(huán)中MicroRNAs被包裹在外

4、泌體、微小體或凋亡小體中，這些膜性結(jié)構(gòu)對MicroRNAs起有效的保護作用。另外對于MicroRNAs的化學(xué)修飾、與蛋白分子或脂質(zhì)的結(jié)合也使得MicroRNAs具有抵抗RNase的能力，這些都提示MicroRNAs成為一種潛在性診斷標志物。因此探討抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎患者血漿中MicroRNAs差異表達變化，尋找具有統(tǒng)計學(xué)意義的MicroRNA，并依此為主線研究可能存在的作為輔助抗NMDA受體腦炎診斷的潛在的診斷標志物。

5、r>　　方法:
　　實驗分2部分。(1)應(yīng)用微陣列基因芯片技術(shù)檢測抗NMDA受體腦炎患者和健康人血漿MicroRNAs的表達水平;篩選出具有統(tǒng)計學(xué)意義的差異表達的MicroRNAs;(2)根據(jù)基因芯片結(jié)果、文獻資料，選擇MicroRNA-140作為評價指標，收集不同顱內(nèi)感染患者血漿，分為4組:健康人組、抗NMDA受體腦炎患者組結(jié)核性腦（膜）炎患者組、病毒性腦（膜）炎患者組，通過實時定量PCR方法檢測各組血漿MicroRNA-140

6、的表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.芯片結(jié)果共篩選出140個與抗NMDA受體腦炎相關(guān)的差異表達miRNAs基因(P＜0.01):53個表達上調(diào)，87個表達下調(diào)。其中MicroRNA-140表達在抗NMDA受體腦炎中表達下調(diào)5倍以上（|log2|=5.11，P=0.004）;
　　2.血漿MicroRNA-140的表達水平在抗NMDA受體腦炎患者組中顯著低于結(jié)核性腦（膜）炎患者組、病毒性腦（膜）炎患者組、健康人組(P＜0.