抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎患者血漿MicroRNA-140表達的初步研究.pdf

1、背景與目的:
　　抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎（Anti-N-methyl-D-aspartate Receptor Encephalitis）是一種自身免疫性中樞神經系統(tǒng)感染性疾病，可伴或不伴卵巢畸胎瘤;隸屬副腫瘤性疾病范疇。臨床上可有前驅期，出現持續(xù)不規(guī)律高熱、頭痛、流感樣癥狀;明顯的精神癥狀，包括焦慮，激越，行為怪異，幻覺，妄想，思維混亂，失眠，語言障礙及厭食或攝食過度表現;記憶力下降、意識水平下降、癲癇發(fā)作、運動功能障

2、礙和自主神經功能紊亂。腦電圖可呈特異性“δ刷”，腦脊液或血清抗NMDAR抗體檢測被認為是診斷該疾病的特異性抗體?？筃MDA受體腦炎可發(fā)病于任何年齡，以兒童和女性多見;女性發(fā)病的中位數年齡為23歲，而卵巢畸胎瘤的檢出與年齡具有相關性，大于18歲女性56％有單側或雙側卵巢畸胎瘤，而小于14歲的女孩則只有不到9％;臨床數據證實早期治療有效，早期診斷、早期免疫抑制劑治療以及伴腫瘤患者施行腫瘤切除對疾病的預后是積極的。但是該腦炎發(fā)病機制未明，目前

3、無確診“金標準”，且該疾病臨床表現個體異質性較大，診斷較困難，臨床癥狀范圍廣，具有潛在的致死風險。因此需要進一步研究，尋找確診該疾病的穩(wěn)定、準確率高、靈敏性高的診斷標志物。
　　MicroRNAs(miRNAs)是一類高保守性、非編碼dxRNA分子，長度約22個核苷酸，通過與靶基因3'端非翻譯區(qū)(3'.UTR)的不完全堿基配對導致靶mRNA降解或翻譯抑制，從而在真核生物中對基因表達起著負調控作用。循環(huán)中MicroRNAs被包裹在外

4、泌體、微小體或凋亡小體中，這些膜性結構對MicroRNAs起有效的保護作用。另外對于MicroRNAs的化學修飾、與蛋白分子或脂質的結合也使得MicroRNAs具有抵抗RNase的能力，這些都提示MicroRNAs成為一種潛在性診斷標志物。因此探討抗N-甲基-D-天冬氨酸受體腦炎患者血漿中MicroRNAs差異表達變化，尋找具有統(tǒng)計學意義的MicroRNA，并依此為主線研究可能存在的作為輔助抗NMDA受體腦炎診斷的潛在的診斷標志物。

5、r>　　方法:
　　實驗分2部分。(1)應用微陣列基因芯片技術檢測抗NMDA受體腦炎患者和健康人血漿MicroRNAs的表達水平;篩選出具有統(tǒng)計學意義的差異表達的MicroRNAs;(2)根據基因芯片結果、文獻資料，選擇MicroRNA-140作為評價指標，收集不同顱內感染患者血漿，分為4組:健康人組、抗NMDA受體腦炎患者組結核性腦（膜）炎患者組、病毒性腦（膜）炎患者組，通過實時定量PCR方法檢測各組血漿MicroRNA-140

6、的表達水平。
　　結果:
　　1.芯片結果共篩選出140個與抗NMDA受體腦炎相關的差異表達miRNAs基因(P＜0.01):53個表達上調，87個表達下調。其中MicroRNA-140表達在抗NMDA受體腦炎中表達下調5倍以上（|log2|=5.11，P=0.004）;
　　2.血漿MicroRNA-140的表達水平在抗NMDA受體腦炎患者組中顯著低于結核性腦（膜）炎患者組、病毒性腦（膜）炎患者組、健康人組(P＜0.