MiRNA與柯薩奇病毒(CVB3)感染相關性研究.pdf

1、目的： 生物體利用RNA干擾作為一種天然的抗病毒機制。過去的幾年已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了在植物病毒、昆蟲病毒以及哺乳動物病毒中都存在抵抗RNAi機制的一些蛋白因子。而最新的研究證明了某些病毒可以編碼其自身的miRNA或miRNA樣分子。此外，宿主編碼的miRNA也可以影響宿主細胞內(nèi)病毒的RNA水平。據(jù)此推測包括miRNA在內(nèi)的RNAi途徑和病毒的基因組之間的相互作用可以深刻影響病毒的生活周期及病毒本身的致病性。因此，我們深入研究了可能參與柯薩

2、奇病毒CVB3感染HeLa細胞過程的miRNA，并進一步分析了這些miRNA對病毒與宿主細胞相互作用的影響。 方法： 利用miRNA克隆技術，檢測CVB3感染HeLa細胞之后是否誘導新的miRNA產(chǎn)生；應用miRNA芯片技術，檢測CVB3感染的HeLa細胞中已知miRNA的表達水平；并在此基礎上應用反義寡核苷酸技術及RNAi載體過表達miRNA方法對可能的一些候選miRNA分子進行功能方面的研究。 結果：

3、 1應用miRNA克隆技術從CVB3感染的HeLa細胞中克隆到了一系列小片段的候選miRNA。 2通過Northern印跡及生物信息學方法預測前體分子，最終確定了四個與CVB3感染相關的新的miRNA。 3通過miRNA芯片技術，篩選出CVB3感染的HeLa細胞中差異表達的8個已知miRNA，包括有表達上調(diào)的5個miRNA和表達下調(diào)的3個miRNA。 4通過對克隆到的CVB3感染相關的新miRNA——miRv-2