細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶途徑與CVB3感染關(guān)系的研究.pdf

1、該文針對ERK1/2信號途徑在CVB3感染過程中的作用以及可能的機制進行了研究.該文首先明確了CVB3感染后Raf-MEK-ERK途徑在HeLa細(xì)胞的活化以建立一個細(xì)胞研究模型.以ERK1/2的磷酸化反映其激活情況,結(jié)果顯示CVB3感染二次激活ERK1/2途徑,即早期短暫激活和晚期的持續(xù)激活.早期的短暫激活出現(xiàn)在感染后10分鐘,而晚期的持續(xù)激活發(fā)生在感染后7小時直到24小時,在感染后12小時達(dá)到高峰.為了解ERK途徑激活在CVB3感染中

2、發(fā)揮的作用,我們使用ERK途徑的選擇性抑制劑UO126抑制ERK的激活,進一步觀察了細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變并利用空斑試驗和實時熒光定量PCR分別測定了子代病毒的滴度和核酸的含量.CAR能夠介導(dǎo)腺病毒和柯薩奇病毒兩種結(jié)構(gòu)毫不相干的病毒的黏附和內(nèi)化,對于病毒的充分?jǐn)z入具有至關(guān)重要的作用.CAR與病毒間相互作用的微小差別就影響病毒的結(jié)合和擴散,對CVB的致病性有明顯的影響.在很多腫瘤細(xì)胞中,抑制Raf-MEK-ERK信號途徑能夠上調(diào)CAR在細(xì)胞表面

3、的表達(dá)促進病毒的進入,但不同細(xì)胞的情況不盡相同.因此,我們觀察了抑制Raf-MEK-ERK信號途徑后CAR在HeLa細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜表面表達(dá)以及腺病毒易感性的變化.抑制Raf-MEK-ERK信號途徑的激活能夠上調(diào)HeLa細(xì)胞的CAR蛋白質(zhì)表達(dá),尤其是細(xì)胞膜表面的表達(dá).但是,抑制Raf-MEK-ERK信號途徑的激活對無復(fù)制型腺病毒的易感性影響不大.提示病毒的易感性可能涉及多種因素的作用,在不同的細(xì)胞可能不盡相同.CAR表達(dá)的變化可能與抑制R