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1、背景:缺血一定時間的心肌在重新恢復血液供應(yīng)后,心肌不一定都會恢復其正常功能和結(jié)構(gòu),反而出現(xiàn)心肌細胞損傷加重的表現(xiàn),如心律失常、出血性壞死、梗死面積擴大、心功能低下等現(xiàn)象,即所謂心肌缺血-再灌注損傷。這也是目前臨床冠狀動脈搭橋術(shù)、經(jīng)皮冠脈腔內(nèi)成形術(shù)及溶栓術(shù)等心臟介入性治療常見的嚴重并發(fā)癥。因此,研究心肌缺血-再灌注損傷的發(fā)生機制及如何減輕心肌缺血-再灌注損傷已成為防治缺血性心臟病和臨床心臟介入性治療的一個重要課題。 杭白菊(Den
2、dranthemamorifolium(Ramat.)Tzvel.,DM)是浙江馳名中外的地道藥材,為“浙八味”之一,有清熱、平肝、明目功能。根據(jù)報道,菊花對冠心病、高血壓有治療作用,其水煎醇沉劑對離體和在體心臟有明顯的擴張冠脈及增加冠脈流量的作用,并減慢心率,影響心肌收縮力。對電刺激兔中樞神經(jīng)引起的缺血性心電圖ST段壓低有減輕作用,并能使兔心的室顫消除而恢復正常搏動。但杭白菊對心肌缺血引起的心肌功能改變的相關(guān)機制研究甚少。 目
3、的:應(yīng)用在體和離體不同心肌缺血模型探討杭白菊提取物對缺血心肌損傷的影響及其相關(guān)機制。 方法:1、在體大鼠心肌缺血模型大鼠麻醉固定,暴露心臟后,絲線結(jié)扎冠狀動脈左前降支根部。于結(jié)扎2h后,頸總動脈取血,測定血清LDH和CK。摘取心臟,以TTC染色測定心肌梗死面積。 2、垂體后葉素誘發(fā)的大鼠急性缺血心肌ST-T的改變記錄大鼠麻醉固定后,將針狀電極插入皮下,記錄標準Ⅱ?qū)?lián)心電圖。經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素0.6u/kg。連續(xù)記錄
4、心電圖30min,分析心電圖ST-T改變情況。 3、在體犬心肌缺血模型動物麻醉固定后,實施左胸廓開胸術(shù),用4號絲線結(jié)扎冠脈左前降支中下1/3交界處。于結(jié)扎前和結(jié)扎后各時點進行心外膜電圖標測,分析心律失常發(fā)生情況并進行心律失常評分,于結(jié)扎前和結(jié)扎后1、2、3小時采血測定LDH和CK。觀察結(jié)束后,放血處死,取心臟,并測定心肌梗死區(qū)重量和面積。 4、心律失常評分法采用Curtis和Walker(1988)心律失常評分法對心律失
5、常嚴重程度進行定量分析。 5、離體心臟Langendorff灌流及缺血-再灌注模型迅速取出心臟,轉(zhuǎn)移、固定于Langendorff灌流裝置,以改良Krebs-Henseleit液(K-H液)行常規(guī)恒壓灌流(76mmHg)。用絲線結(jié)扎冠脈的左前降支(LAD)120min。用試劑盒檢測心肌超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),作為心肌損害和膜脂質(zhì)過氧化的指標。 結(jié)果:1、在體大鼠冠脈結(jié)扎引起的心肌缺血模型(1)杭白菊提
6、取物對大鼠心肌梗死面積的影響:與冠脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降支結(jié)扎2小時后,三個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組均有明顯的降低心肌梗死面積的作用。 (2)杭白菊提取物對大鼠心肌缺血后血清LDH和CK的影響:與冠脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降支結(jié)扎后2小時,三個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后血清LDH的作用,中、高兩個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后血清CK的
7、作用。 2、杭白菊提取物對垂體后葉素誘發(fā)的大鼠急性缺血心肌ST-T改變的影響與模型對照組比較,注射垂體后葉素后10s和15s,三個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組由垂體后葉素引起的急性心肌缺血性ST-T抬高明顯降低。 3、杭白菊提取物對離體大鼠心臟缺血-再灌后心肌MDA和SOD的影響單純?nèi)毖?再灌注組心肌SOD含量與假手術(shù)組相比明顯降低,MDA含量升高;杭白菊+缺血-再灌注組心肌SOD含量明顯高于單獨缺血-再灌
8、注組,MDA含量較單獨缺血-再灌注組顯著降低。 4、在體犬冠脈結(jié)扎引起的心肌缺血模型(1)杭白菊提取物對犬急性心肌缺血引起的心肌梗死重量/面積的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降支結(jié)扎3小時后,三個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組均有明顯的降低心肌梗死重量/面積的作用(P<0.01)。銀杏葉提取物組心肌梗死重量和面積分別為模型對照組的28.75%和27.67%,高劑量杭白菊提取物組與陽性藥組效果相當。 (2
9、)杭白菊提取物對犬急性心肌缺血后血清LDH和CK的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降支結(jié)扎后的3小時內(nèi),三個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后60min、120min和180min三個時點的冠狀竇血血清LDH的作用。銀杏葉提取物組在結(jié)扎后60min、120min和180min冠狀竇血血清LDH量分別為模型對照組的72.44%、74.36%和67.83%,高劑量杭白菊提取物組與陽性藥組效果相當。 與冠
10、脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降支結(jié)扎后的3小時內(nèi),低劑量杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組均有明顯降低結(jié)扎后60min、120min和180min三個時點的冠狀竇血血清CK的作用;中、高劑量杭白菊提取物組明顯降低結(jié)扎后60min和180min時冠狀竇血血清CK,在結(jié)扎后120min時點雖然有降低CK的趨勢,但無統(tǒng)計學差異。 (3)杭白菊提取物對犬冠脈結(jié)扎后心外膜電圖標測心肌缺血范圍和程度的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降
11、支結(jié)扎后的3小時內(nèi),三個劑量的杭白菊提取物組和陽性藥銀杏葉提取物組對犬急性心肌缺血引起的ST段升高總和(∑ST)及其冠脈結(jié)扎前后∑ST差值(△∑ST)、ST段升高大于2mV的標測點數(shù)(NST)及其標測點差值(△NST)有明顯的降低作用。 (4)杭白菊提取物對犬冠脈結(jié)扎后心律失常發(fā)生嚴重程度的影響與冠脈結(jié)扎模型組比較,冠狀動脈前降支結(jié)扎后的3小時內(nèi),中、高劑量的杭白菊提取物組對犬急性心肌缺血期間的心律失常評分有明顯的降低作用,未觀
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