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文檔簡(jiǎn)介
1、據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)報(bào)道,心腦血管疾病是目前嚴(yán)重威脅人類健康的頭號(hào)殺手,2008年1730余萬(wàn)死于心血管疾病,占死亡比例的30%,推測(cè)到2030年,約2360萬(wàn)人將死于心血管疾病,它將仍是影響人類生存的最主要致死因素。同時(shí)隨著人口老齡化的發(fā)展,神經(jīng)退行性病變?cè)谌巳褐兴嫉谋壤苍谥饾u增加,WHO報(bào)道現(xiàn)有接近3560萬(wàn)的癡呆癥患者,預(yù)測(cè)到2030年這一數(shù)字將翻倍,達(dá)到6570萬(wàn),到2050年將超過(guò)三倍達(dá)11540萬(wàn)。
鑒于報(bào)道葡萄中
2、含有的白藜蘆醇、花青素等多酚類物質(zhì)具有抗心腦疾病的潛力,本課題就懸浮培養(yǎng)的葡萄細(xì)胞的提取物在心肌保護(hù)和預(yù)防老年癡呆方面的作用展開了研究。
首先對(duì)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得的葡萄細(xì)胞進(jìn)行了有效成分的提取分離,建立并優(yōu)化了微波法針對(duì)葡萄細(xì)胞的高效提取工藝,即以20%乙醇作為提取溶劑,料液比1:5,微波輸出功率設(shè)定600 W,提取最高溫度75℃,微波提取2 min可高效提取葡萄細(xì)胞中的白藜蘆醇苷;同時(shí)確定了提取物的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),粗提物
3、分別經(jīng)乙酸乙酯萃取、D101大孔樹脂純化和硅膠柱純化可獲得白藜蘆醇苷含量分別達(dá)30%,50%,80%以上的葡萄細(xì)胞提取物。其次,三種組分的葡萄細(xì)胞提取物分別針對(duì)H9c2和PC12兩株細(xì)胞進(jìn)行心肌保護(hù)和神經(jīng)保護(hù)的活性篩選,結(jié)果顯示葡萄細(xì)胞提取物VVE388在50μg/ml的較低濃度下對(duì)H2O2損傷的PC12細(xì)胞具有顯著的保護(hù)作用。最后,就VVE388的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制展開了研究。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,以VVE388預(yù)處理的細(xì)胞組總SOD活力
4、較損傷組提高19倍左右,GSH含量較損傷組提升31%±3.7%。總SOD活力和GSH含量均顯著提高,提示VVE388可通過(guò)調(diào)控SOD活力和GSH的量來(lái)清除進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物,抵抗H2O2產(chǎn)生的O2·-和·OH對(duì)細(xì)胞造成的損傷而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,同時(shí)ROS積累實(shí)驗(yàn)也證明了這一點(diǎn),以VVE388預(yù)處理組的ROS積累量較H2O2損傷組顯著降低了47.3%±6.7%。同時(shí)凋亡實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)VVE388可降低H2O2損傷造成的PC12細(xì)胞凋亡的比
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