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文檔簡介
1、目的:(1)研究脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CR1活化通路在化療藥物誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛中的作用。(2)探討天麻素對(duì)化療藥物誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛的抑制作用及其脊髓水平機(jī)制。
方法:(1)大鼠鞘內(nèi)置管并篩選出痛閾值合格的SD大鼠36只,采用隨機(jī)配伍的方法分為3組:對(duì)照組、模型組、工具藥米諾環(huán)素組。用隔日腹腔注射長春新堿(125μg/kg)的方法建立化療藥物誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型,工具藥米諾環(huán)素組從建立化療痛模型前1天起每日鞘內(nèi)注射
2、米諾環(huán)素(100μg/rat,10μL),其它各組同步注射生理鹽水。分別用Electronic vonfrey測(cè)痛儀和熱刺痛儀測(cè)定大鼠機(jī)械痛閾值及熱痛閾值,免疫熒光法檢測(cè)脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞特異性活化標(biāo)志物Iba1的表達(dá),Western Blot法檢測(cè)脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白表達(dá)和TNF-α蛋白的表達(dá)。(2)根據(jù)痛閾值大小篩選出合格的SD大鼠60只,采用隨機(jī)配伍的方法分為5組:對(duì)照組、模型組、天麻素低劑量組(30mg/
3、kg)、天麻素中劑量組(60mg/kg)、天麻素高劑量組(120mg/kg)。用隔日腹腔注射長春新堿(125μg/kg)的方法建立化療藥物誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型,采用不同劑量的天麻素治療化療痛大鼠,分別用Electronic vonfrey測(cè)痛儀和熱刺痛儀測(cè)定大鼠機(jī)械痛閾值及熱痛閾值,免疫熒光法檢測(cè)脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞特異性活化標(biāo)志物Iba1的表達(dá),Western Blot法檢測(cè)脊髓CX3CR1蛋白和p-p38MAPK蛋白表達(dá),El
4、isa法檢測(cè)脊髓TNF-α蛋白表達(dá)。
結(jié)果:(1)與對(duì)照組相比,模型組大鼠機(jī)械痛閾值和熱痛閾值顯著降低(P<0.05或P<0.01),脊髓背角Iba1蛋白、脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白和TNF-α蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01);與模型組相比,工具藥米諾環(huán)素組大鼠機(jī)械痛閾值和熱痛閾值相對(duì)升高(P<0.05),脊髓背角Iba1蛋白、脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白和TNF-α蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.
5、05或P<0.01)。(2)與對(duì)照組比較,模型組大鼠機(jī)械痛閾值和熱痛閾值明顯降低(P<0.05或P<0.01),脊髓背角Iba1蛋白、脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白和TNF-α蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01);與模型組比較,天麻素治療組大鼠機(jī)械痛閾值與熱痛閾值有不同程度的升高(P<0.05或 P<0.01),脊髓背角Iba1蛋白、脊髓CX3CR1蛋白、p-p38MAPK蛋白和TNF-α蛋白表達(dá)有不同程度的降低(P<0.05
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